Peptonada Foundation, voorbereiding en gebruik

Hij peptonada water Het is een middel voor vloeibare verrijking, niet selectief, voornamelijk gebruikt als een verdunningsmiddel van voedselmonsters of andere materialen. Dit betekent vanuit chemisch oogpunt, het is heel eenvoudig, het bevat pepton van vlees, natriumchloride en water.

Het heeft een voedingswaarde, waardoor het monster kan worden verrijkt. Als er gehavende bacteriën zijn, heeft dit medium de kracht om de levensvatbaarheid te herstellen. Het is vooral nuttig bij het herstel van bacteriën die tot de familie Enterobacteriaceae behoren.

Peptonada -water in potten. Bron: MSC. Marielsa Gil

In het geval van het herstel van Salmonellas wordt het gebruik van de gebufferde peptonada -watervariant aanbevolen; Dit dient als een middel om het monster vooraf te verrijken, in dit geval bevat het andere elementen zoals dysótisch fosfaat en dipotassiumfosfaat.

Normaal bereikt peptonada -water de neutrale pH, maar er zijn andere varianten waarbij de pH nodig is om 8,5 ± 0,2 (alkalisch) te zijn, omdat de bacteriën die bedoeld zijn om te isoleren alkalofiel is Vibrio cholerae.

Aan de andere kant kan dit medium worden gebruikt als basismedium voor koolhydraatfermentatietests.

[TOC]

Basis

Peptonas bieden de voedingsstoffen die nodig zijn voor bacteriële ontwikkeling, met name stikstof- en korte ketenaminozuren, terwijl natriumchloride de osmotische balans behoudt.

Bovendien maakt het medium het mogelijk om bacteriecellen te verspreiden, te homogeniseren en te repareren die zijn beschadigd door onderdompeling aan industriële processen.

Aangezien het verdunningsmiddel ideaal is, is het effectief vervangen van de fysiologische oplossing (SSF) of de fosfaatdempingoplossing (PBS).

Bacteriegroei wordt duidelijk door de observatie van de troebelheid van hetzelfde.

Voorbereiding

Zelfgemaakte (niet -commerciële) voorbereiding

Weeg 1 gr gram pepton en 8,5 gr van natriumchloride, lost op in 1 liter gedestilleerd water. De pH moet worden aangepast aan 7.0. Hiervoor kunt u natriumchloride 1 n gebruiken.

Kan u van dienst zijn: tijdelijke gewassen

Voorbereiding met commercieel medium

Weeg 15 gr van uitgedroogd medium en lost op in een liter gedestilleerd water. Homogenize het mengsel. Indien nodig wordt het mengsel 1 minuut gekookt om de totale oplossing te helpen. Serveer indien nodig in 100 ml potten of 10 ml buizen. Autoclavar gedurende 15 minuten bij 121 ° C.

Koel en gebruik in koelkast. De uiteindelijke pH van het medium is 7,2 ± 0,2.

De kleur van het gedehydrateerde medium is licht en bereid beige is duidelijk amber.

Voorbereiding op gistingstests

Aan de vorige voorbereiding - na sterilisatie - moet koolhydraten worden toegevoegd aan een laatste 1%concentratie, plus de ANDRADE -indicator (zuur fuchsin) of rode fenol (0.018 g/l). De buizen moeten een Durham Bell worden geplaatst voor observatie van gasvorming.

Andere Peptonada -watervarianten

-Peptonada -water gebufferd

Dit bevat enzymatisch caseïne gehydrolyseerd, natriumchloride, dihydrogene fosfaat van kalium en waterstof natriumdodecahydraat natriumfosfaat. De uiteindelijke pH is 7,0 ± 0,2.

Weeg 20 gr van het gedehydrateerde medium en lost op in 1 liter gedestilleerd water om ter voorbereiding te doen. Verlaat ongeveer 5 minuten. Verwarm met 1 minuut tot het volledig is opgelost.

Giet over voldoende potten volgens de noodzaak. Steriliseer 15 minuten met behulp van de autoclaaf bij 121 ° C.

-Alkalisch peptonada water

Weeg 25 gr van het gedehydrateerde medium en lost op in 1 liter water. Ga verder zoals hierboven beschreven. De pH varieert van 8,3 tot 8,7.

Gebruik

Het inoculum wordt gedaan door het monster rechtstreeks te plaatsen.

Het wordt gebruikt om de monsters te verdunnen, vooral wanneer wordt vermoed dat er beschadigde bacteriën kunnen zijn. Over het algemeen zijn verdunningen 1:10 en 1: 100.

Kan je van dienst zijn: waarom produceren schimmels geen eigen voedsel?

Het wordt 24 uur geïncubeerd in aerobiose bij 35-37 ° C.

Ontlasting monsters

Voor ontlastingsmonsters op zoek naar Salmonella wordt het gebruik van gebufferd of gebufferd water aanbevolen als een middel voor pre-enrique.

Om dit te doen, ga als volgt verder:

Als de uitwerpselen worden gevormd om 1 gr gram monster te nemen. Als ze vloeistof zijn, neem dan 1 ml uitwerpselen en hangt in een buis met 10 ml gebufferd peptonada -water. Download in het geval van rectale wattenstaafjes het materiaal in het wattenstaafje in de buis met gebufferd water van Peptonada.

Meng en homogeniseren het monster in alle gevallen zeer goed.

Incubeer bij 37 ° C gedurende 18 tot 24 uur. Vervolgens subcultureel in een verrijkingsbouillon als een selenito-bouilloncystine of tetrationate bouillon bij 37 ° C gedurende 18-24 uur meer. Eindelijk groeien in selectieve media voor Salmonella, zoals Agar SS, Agar XLD, Hektoen Agar, onder anderen.

Voedselmonsters

Peptonada-water wordt gebruikt als een manier van verrijking of als een eenvoudig verdunningsmiddel, maar als soorten salmonella worden gezocht, wordt het gebruikt als een middel voor pre-enquiek, zoals reeds beschreven.

Ga in eten als volgt verder:

Voor vaste voedingsmiddelen betreft 25 gr van het monster en voor vloeibaar voedsel, meet 25 ml hetzelfde. Plaats dit gedeelte in potten met 225 ml Peptonada -water. Meng en homogeniseren het monster.

Als wordt vermoed dat de microbiële belasting hoog is, kunnen seriële of decimale verdunningen worden uitgevoerd om de telling van de kolonies te vergemakkelijken die eenheden vormen (UFC).

Het aantal verdunningen is afhankelijk van het type monster en de analytische ervaring.

Als integendeel wordt vermoed dat de microbiële belasting erg laag is, is het niet nodig om verdunningen uit te voeren. Vervolgens, subjectief in selectieve media.

Kan u bedienen: Catalase: kenmerken, structuur, functies, pathologieën

In het geval van voedsel uit de zee, zoals zeevruchten, vissen, onder anderen op zoek naar Vibrio cholerae of andere soorten Vibrio, peptonada -water aangepast aan pH 8,5 (alkalisch peptonada water) moet worden gebruikt (alkalische peptonada).

QA

Van elk voorbereide kavel moet men twee buizen incuberen zonder 24 uur te inoculeren in aerobiose bij 37 ° C. De tijd is voorbij, troebelheid of kleurverandering mag niet worden waargenomen.

Bekende bedieningselementen kunnen ook worden gebruikt om de effectiviteit ervan te evalueren:

Hiervoor kunt u de volgende bacteriestammen gebruiken: Escherichia coli ATCC 25922, Escherichia coli ATCC 8927, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Salmonella Typhimurium ATCC 1428, Salmonella enteritidis ATCC 13076.

In alle gevallen wordt een bevredigende microbiële ontwikkeling verwacht, die wordt waargenomen door troebelheid van de omgeving.

Beperkingen

-Het uitgedroogde medium is erg hygroscopisch, dus het moet uit de buurt van vocht worden gehouden.

-Het medium mag niet worden gebruikt als er een soort verslechtering wordt waargenomen.

-Het gedehydrateerde kweekmedium moet worden bewaard tussen 10 - 35 ° C

-Het voorbereide medium moet gekoeld worden gehouden (2-8 ° C).

Referenties

1. Camacho A, Giles M, Ortegon A, Palao M, Serrano B en Velázquez of. Technieken voor voedselmicrobiologische analyse. 2009, 2e ed. Faculteit Chemie, Unam. Mexico. Versie voor handmatige en documentenbeheerder (Amyd) van de faculteit Chemie, UNAM 1. Beschikbaar op: http: // depa.Fquim.UNAM.mx
2. Britania Laboratories. Peptonada -water gebufferd. 2015. Beschikbaar op: Britanialab.com
3. Neogen Laboratories. Peptonada water. Beschikbaar op: Foodsafety.Neogen.com
4. Britania Laboratories. Peptonada water. 2015. Beschikbaar op: Britanialab.com
5. Merck Laboratories. Peptonada gebufferd water. Beschikbaar op: Merckmillipore.com
6. Conda pronadisa laboratoria. Alkalisch peptonada water. Beschikbaar bij: Condalab.com
7. Forbes B, Sahm D, Weissfeld a. (2009). Bailey & Scott microbiologische diagnose. 12 ed. Pan -Amerikaanse redactionele s.NAAR. Argentinië.