Agar XLD Foundation, voorbereiding en gebruik

Hij Xld agar o Acho Xilosa Lysine Desoxicate is een selectieve en differentiële vaste cultuur voor enteropathogene isolatie. Taylor ontwierp de XL Agar -formule (xylose, lysine) om de isolatie van het Shigella -geslacht te verbeteren.

Hij merkte op dat dit genre werd geremd in de meeste media die bestemd waren voor enteropathogeen isolatie. Vervolgens werd hij natriumdexolaat, natriumthiosulfaat en ijzige amonisch citraat toegevoegd om zijn selectiviteit te vergroten. Deze formule is nuttig gebleken voor zowel Shigella als Salmonella Isolation.

Verschillen met de koloniën van Shigella, Salmonella en coliformen in Agar XLD. NAAR. Shigella SP, B. Salmonella SP, C. Coliformen. Bronnen: a. Door: CDC/ Amanda Moore, MT; Todd Parker, PhD; Audra Marsh, Courtesy: Public Health Image Library B. https: // upload.Wikimedia.org/wikipedia/commons/1/1f/salmonella_species_growing_on_xld_agar _-_ show_h2s_productie _-_ gedetailleerd.JPG C. Door: CDC/DR. J. J. Farmer, Courtesy: Public Health Image Library

De XLD -agar bestaat uit gistextract, natrium, xylose, lysine, lactose, sucrose, natriumthiosulfaat, ijzer ammoniumcitraat, natriumchloride, rode fenol en agar en agar en agar en agar. In de meeste bacteriologie -laboratoria wordt het Agar XLD en SS Agar -duo gebruikt voor de studie van fecale monsters op zoek naar Shigella en Salmonella.

Andere laboratoria geven de voorkeur aan de combinatie van Chromagar Salmonella en Agar XLD, onder andere beschikbare opties. Deze duo's kunnen worden voorbereid in dubbele Petrie -platen. Aan de ene kant plaatsen ze agar xld en aan de andere kant het andere gekozen medium.

[TOC]

Basis

-Voedingskracht

De XLD -agar heeft het gistextract, dat dient als een bron van voedingsstoffen voor de micro -organismen die zich in deze agar ontwikkelen. Bovendien levert de aanwezigheid van koolhydraten (xylose, sucrose en lactose) energie aan de bacteriën die ze kunnen fermenteren.

-Gemiddelde selectiviteit

Als een remmende stof presenteert het natriumlay -out; Dit voorkomt de groei van gram positieve bacteriën, waardoor het medium selectieve karakter krijgt.

-Differentiële kracht

Typische Shigella -kolonies

Zoals reeds vermeld, bevat de XLD -agar xylose; Deze koolhydraat wordt gefermenteerd door alle bacteriën die in dit medium groeien, behalve het geslacht Shigella.

Kan u van dienst zijn: Hardy-Weinberg Law

Dit is een van de kenmerken die het differentiële karakter biedt, omdat de koloniën van Shigella de rest onderscheiden door rode kolonies te ontwikkelen, terwijl de andere bacteriën gele kolonies produceren.

Typische kolonies van Salmonella

De geslacht Salmonella vergist ook de xylose, die aanvankelijk gele kolonies genereert. Na het uitputten van het xylose -koolhydraat valt lysine echter aan door zijn enzym lysine decarboxylase. Lysine -decarboxylering genereert alkalis die de kleur van de kolonie en het originele rood tot het originele rood maken.

Dit gedrag wordt alleen uitgevoerd door Salmonella, sinds de coliformen die decarboxyle. Dit komt omdat coliformen ook lactose en sucrose aanwezig zijn; Daarom is de zure productie erg hoog, waardoor de gele kolonie in deze bacteriën blijft.

Opgemerkt moet worden dat de gender salmonella de sucrose niet fistent, noch lactose.

H₂S

De XLD -agar maakt het ook mogelijk om de soort Salmonella -producenten van H te detecteren₂S; Om dit te doen, heeft het de sulfidebron weergegeven door natriumthiosulfaat en een reactieontwikkelaar die het ijzersterkitraat is.

De laatste reageert met h₂S (kleurloos gas) en vormt een zichtbaar zwart neerslag onoplosbaar ijzersulfaat. In die zin zullen de kenmerken van Salmonella's kolonies rood zijn met een zwart centrum.

Opgemerkt moet worden dat voor de reactie van H₂S, een alkalische pH is nodig. Dat is de reden waarom andere enterobacteriën die vormen H₂Ze kunnen het niet doen of het slecht doen in deze omgeving, omdat de hoge zuurgraad die ze produceren bij het fermenteren van de aanwezige koolhydraten die de reactie remmen of belemmeren.

-Natriumchloride, agar en fenolrood

Ten slotte handhaaft natriumchloride het osmotische evenwicht; De agar is het stollingsmiddel en het rood van fenol detecteert de pH -veranderingen, waardoor de kleur van de koloniën en het medium wordt gekeerd.

Voorbereiding

Weeg 55 gr van XLD uitgedroogd en los op in 1 liter water. Verhit en schud het mengsel totdat het het kookpunt bereikt. Wees niet oververhit, omdat warmte het medium beschadigt en een neerslag creëert dat de morfologie van de typische kolonies verandert.

Kan u van dienst zijn: proteoglycanen

Dit medium mag niet worden geautoreerd. Bij het oplossen moet u van 50 ° C naar een badkamer gaan. Bij het koelen moet rechtstreeks op de steriele platen worden geserveerd. Ze kunnen in eenvoudige borden of dubbele platen worden geduwd. Ze mogen tot gebruik in de koelkast stollen en in de koelkast houden.

Humeur voordat u gebruikt. Net als een niet -versterkte medium, wordt het aanbevolen om het in de buurt van de gebruiksdatum voor te bereiden.

De uiteindelijke pH van het medium moet op 7,4 ± 0,2 zijn. De kleur van het voorbereide is oranje rood, doorzichtig, zonder neerslag.

Als er een lysine xylose -agar (XL) is, kan natriumthiosulfaat en amonisch ijzercitraat worden toegevoegd. Op deze manier wordt de XLD Agar -formule verkregen.

Toepassingen

De XLD -agar wordt gebruikt voor het herstel van enteropathogenen, voornamelijk van het Shigella -geslacht en in de tweede plaats van het geslacht Salmonella. Het is handig voor het evalueren van ontlasting, water en voedselmonsters.

Soorten monsters

Kruk

De ontlastingsmonsters kunnen rechtstreeks in de XLD -agar worden gezaaid, waardoor het materiaal een goede verdeling van het materiaal is om geïsoleerde kolonies te verkrijgen.

Om het herstel van Salmonella te verbeteren, kan de XLD zijn overeengekomen uit verrijkingsmiddelen voor Salmonella kan worden gezaaid.

Voedsel

In het geval van voedsel kunnen verrijkingsbouillons worden gebruikt voor Salmonella en Shigella. Voor Salmonella kunt u onder andere Selenito -bouilloncystine, Bright Green Tetrationate -bouillon gebruiken.

In het geval van Shigella kan het worden verrijkt met de Shigella-bouillon met 0,5 µ/ml novobiocina, gedurende 16-20 uur geïncubeerd bij 42 ° ± 1 ° C.

Water

In wateranalyse worden de membraanfiltratietechniek en het gebruik van XLD Agar onder andere aanbevolen.

Gezaaide en identificatievoorwaarden

Het gezaaide medium wordt 24 tot 48 uur in aerobiose geïncubeerd bij 35 ° C.

Het kan u van dienst zijn: Flora en Fauna of India

De typische kolonies van elk genre worden waargenomen, de verdachte kolonies moeten biochemische tests worden uitgevoerd voor identificatie.

QA

Om de medium -kwaliteitscontrole te evalueren, kunnen de volgende bacteriestammen worden gebruikt: Salmonella Typhimurium ATCC 14028, Salmonella enteritidis ATCC 13076, Salmonella Abony DSM 4224, Shigella flexneri ATCC 12022, Shigella sonnei ATCC 25931, Escherichia coli ATCC 25922, Proteus Mirabilis ATCC 43071, Klebsiella pneumoniae ATCC 33495.

Het Salmonella -geslacht wordt gekenmerkt door te presenteren in deze middelgrote rode kolonies met zwart centrum of volledig zwarte kolonies. Terwijl, in het Shigella -geslacht, de kolonies rood moeten zijn, dat wil zeggen de kleur van het medium.

In het geval van Escherichia coli Verwacht wordt dat het volledig of gedeeltelijk wordt geremd; Als de koloniën groeien, zijn geel. Voor Proteus Mirabilis Schaarse groei wordt verwacht met roze kolonies met of zonder zwart centrum. Ten slotte zal het geslacht Klebsiella groeien als gele koloniën.

Laatste overwegingen

De XLD -agar wordt zeer gebruikt in bacteriologielaboratoria vanwege zijn hoge efficiëntie voor het herstel van Shigella en heeft ook een goed herstel van het Salmonella -geslacht.

Rall en medewerkers (2005) in hun werk getiteld "Evaluatie van drie verrijkingsbouilles en vijf solide media voor de detectie van Salmonella in pluimvee" toonde dat van de 3 klassieke media bewezen (Bright Green Agar, SS Agar en Agar XLD), Agar XLD verkregen het beste herstelpercentage.

De herstelpercentages waren de volgende: 13.8% voor felgroene agar, 27.6% voor SS en 34.5% voor XLD. Het werd alleen overtroffen door chromogene media -agar Rambach met 48% herstel en chromagar met 79.3%.

Referenties

1. Overgedragen aan voedsel overgedragen ziekten. Shigellose. Beschikbaar op: Anmat.Gov.AR
2. “Agar XLD." Wikipedia, gratis encyclopedie. 9 feb 2019, 11:46 UTC. 10 april 2019, 19:25 Wikipedia.borg
3. BBL Laboratories. Chromagar Salmonella / BD XLD Agar (BIPACCA).2013 beschikbaar op: BD.com
4. Laboratorium. Neogen. Xld agar. Beschikbaar op: Foodsafety.Neogen
5. Francisco Soria Melguizo Laboratory. Xld agar. Beschikbaar op: http: // f-soria.Het is/informeren
6. Rall L, Rall R, Aragon C, Silva M. Evaluatie van drie verrijkingsbruths en vijf plating media voor Salmonella -detectie in pluimvee. Braz. J. Microbiol.  2005; 36 (2): 147-150. Beschikbaar van: Scielo.BR
7. Forbes B, Sahm D, Weissfeld a. (2009). Bailey & Scott microbiologische diagnose. 12 ed. Pan -Amerikaanse redactionele s.NAAR. Argentinië.