Biggy agar, voorbereiding en gebruik

Hij Biggy agar Het is een solide, selectieve en differentiële cultuurmedia. Het is ontworpen om de identificatie van de belangrijkste soorten Candida te isoleren en te helpen. Zijn naam Biggy komt van het acroniem in het Engels Bismuth Glucose Glycine Yeas.

De oorspronkelijke formule is gemaakt door Nickerson, dus dit medium staat ook bekend als Nickerson Agar. Het is momenteel samengesteld uit gistextract, glycine, dextrose, ammoniumcitraat, bismutcitraat, natriumsulfiet en agar.

Grafische weergave van de biggy agar. Bron: Flickr.com

Biggy Agar is geformuleerd voor de differentiatie van complexe soorten C. Albicans, c. Tropicalis, c. Krusei en C. Kefyr, Maar andere soorten zoals Candida Glabrata, c. parapsilosis, c. Guilliermondii, Trichhosporun SP, Geotrichum Candidum en Saccharomyces cerevisiae.

Het heeft een goede gevoeligheid en specificiteit, maar bij het vergelijken met andere media met een vergelijkbare functie staat dit op de tweede plaats en wordt overwonnen door Chromagar. Om deze reden geven veel laboratoria de voorkeur aan het laatste, hoewel het veel duurder is.

Het moet duidelijk zijn dat het gebruik van de biggy agar, evenals andere vergelijkbare middelen, een snelle vermoedelijke identificatie helpen, maar nooit bevestigen. Daarom moeten aanvullende identificatiemethoden beschikbaar zijn; Bijvoorbeeld Vitek 32 en API 20 identificatiesystemen.

[TOC]

Basis

De biggy agar wordt beschouwd als een gedeeltelijk selectief medium voor het isolement van gisten, vooral van het Candida -geslacht, hoewel andere genres kunnen groeien.

Het is ook een differentiaal medium, omdat, afhankelijk van de betrokken soort, verschillende kenmerken worden waargenomen in aspect, kleur, vorm en grootte. Het wordt beschouwd als een chromogeen medium, voor de ontwikkeling van verschillende kleuren in de koloniën.

Kan u van dienst zijn: Metionine: kenmerken, functies, voedsel, voordelen

De kleur gepresenteerd door de kolonies van gisten is te wijten aan de aanwezigheid van bismuts sulfiet in de agar. Nickerson realiseerde zich dat de gisten van het geslacht Candid. Dit is gekolonies tussen licht tot zwart.

Deze agar bevat gist- en dextrose -extract, dat de bron van basisvoedingsstoffen en energie biedt voor de ontwikkeling van gisten. Glycine is een stimulering van de groei van gisten, terwijl de ontwikkeling van bepaalde bacteriën wordt geremd.

In dezelfde zin fungeren ammonium en bismutcitraat, evenals natriumsulfiet als bacteriegroeiremmers. De agar is de agent die de solide consistentie aan de omgeving geeft.

Voorbereiding

Weeg 45 gr van gedehydrateerde cultuur en lost op in een liter gedestilleerd water. Schud en verwarm het mengsel en laat 1 minuut koken aan de volledige oplossing. Dit kweekmedium wordt niet gesteriliseerd in Autoclave.

Bij het afkoelen van ongeveer 45 ° C in maria giet 20 ml 20 ml op petri -steriele platen.

De kleur van het gedehydrateerde medium is geelachtig en bereid grijs is een geelachtige witte gel, waarbij een licht vlokkoordmotor kan worden waargenomen.

De pH moet 6,8 ± 0,2 zijn.

Het voorbereide medium moet worden opgeslagen in de koelkast (4 ° C) en beschermen tegen licht. Zoals een middel is dat niet zelf -clava zo snel mogelijk moet worden gebruikt. Het gebruik ervan wordt aanbevolen voordat het 3 dagen sinds zijn voorbereiding bijeenkomt.

Kan u van dienst zijn: biomaterialen

Gebruik

De platen worden met 24, 48 en 72 uur bij kamertemperatuur (25 ° C) geïncubeerd, de incubatietijd kan tot 5 dagen worden verlengd.

Elke soorten Candida ontwikkelt bepaalde kenmerken die ze van elkaar onderscheiden. De mediumfabrikanten beschrijven de volgende kenmerken voor elke soort:

-Candida albicans complex: Het ontwikkelt zich in deze agar als gladde, ronde, bruine of zwarte kolonies, met een lichte myceliale rand. Met het voorbehoud dat de donkere kleur niet naar de omgeving is verspreid.

-Candida tropicalis: De heldere, kleine, donkere heldere koloniën, met zwarte en lichte myceliale rand. De donkere kleur verspreidt zich naar de omgeving, kenmerk die typerend is voor deze soort, na 72 uur te zijn geïncubeerd.

-Candida Krusei Ontwikkel ruwe, platte uitziende kolonies, met de rand tussen bruin tot negruzco.

-Candida Parakrusei: medium -grootte kolonies, meestal met ruw uiterlijk, plat. De kleur kan variëren tussen heldere donkere roodachtige koffie om roodachtige koffie aan te steken. De rand van de koloniën heeft een uitgebreid, geelachtig mycelium.

-Candida stellelatoid: Ontwikkel medium, platte kolonies, donkerbruin, bijna zwart. Myceliale ontwikkeling is erg schaars.

Een studie door Yücesoy en Marol in 2003, toonde aan dat het chromagar -medium een ​​betere gevoeligheid en specificiteit presenteert voor de differentiatie en identificatie van verschillende candida -soorten dan de biggy agar.

QA

Voor steriliteitscontrole worden platen geïncubeerd zonder te inoculeren bij 25 ° C, in het donker gedurende 24 tot 48 uur, er wordt verwacht dat er geen enkele groei of kleurverandering is.

Het kan u van dienst zijn: gevoel van aanraking: onderdelen, hoe het werkt en functies

De aanbevolen ATCC -stammen om medium -kwaliteitscontrole uit te voeren zijn:

Candida albicans complex  ATCC 60193, Candida Glabrata ATCC 2001, Candida Krusei ATCC 34135. In alle groei wordt de groei verwacht zoals hierboven beschreven.

U kunt ook de volgende stammen gebruiken:

Escherichia coli ATCC 25922, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 en Staphylococcus epidermidis ATCC 12228. In de eerste twee wordt de totale remming verwacht, maar in het geval van gedeeltelijk groeiende kolonies zullen de crèmekleur zijn.

In het geval van S. aureus Verwacht wordt dat het volledig wordt geremd, maar als ze gedeeltelijk groeien, zijn hun kolonies blank.

Beperkingen

Sommige bacteriën kunnen zich in dit medium ontwikkelen en kunnen zelfs donker worden, een candida -buurman simuleren.

Tabel: Kenmerken van de koloniën van sommige gisten in Biggy zijn overeengekomen volgens het werk van Yücesoy M en Marol S.

Bron: Yücesoy M, Marol S. Prestaties van Chromagar Candida en Biggy Agar voor identificatie van Yeas -soorten. Ann Clin Antimicrob Microbiol. 2003; 2 (8): 1-7

Referenties

1. Yücesoy M, Marol S. Prestaties van Chromagar Candida en Biggy Agar voor identificatie van Yeas -soorten. Ann Clin Antimicrob Microbiol. 2003; 2 (8): 1-7.
2. MCD Lab. Biggy Aging Technical File. Beschikbaar op: McDlab.netto/
3. Lab Neogen. Biggy agar. Beschikbaar op: Foodsafety.Neogen.com
4. Conda pronadisa laboratoria. Biggy agar. Beschikbaar bij: Condalab.com
5. BD Laboratories. BD Biggy Agar (Bismuth Glucose Glycine Yaest Agar). 2011. Beschikbaar op: BD.com