Tioglicolaatbouillon foundation, voorbereiding en gebruik

Hij Tioglycolaatbouillon Het is een verrijkt middel voor vloeistofconsistentie. Het is bekend met het acroniem FTM). Het werd gemaakt door Brewer en gemodificeerd in 1944 door Vera, die hem peptone van caseïne opnam.

Dit medium heeft een lage oxidatiepotentieel -reductie, dus het wordt niet aanbevolen voor de ontwikkeling van strikte aerobe bacteriën, maar het is ideaal voor het herstellen van optionele aerobe bacteriën, strikte en microaerofiele anaërobe bacteriën.

Tioglycolaatbouillon zonder indicator. Proef vaginale secretie. Bron: Bobjgalindo [CC BY-SA 4.0 (https: // creativeCommons.Org/licenties/by-sa/4.0)]

De hoge prestaties waargenomen met dit medium in het isolement en de herstel van een breed scala aan micro -organismen, heeft het geaccepteerd door de Amerikaanse farmacopee (USP), door de Official Association of Agricultural Chemists (AOAC) en door de Europese Pharmacopee (EP).

Deze organisaties bevelen het aan voor de steriliteitscontroletests van farmaceutische producten en voor de verrijking van verschillende soorten monsters.

De thioglycolaatcado bestaat uit gistextract, digreatische caseïne, watervrij dextrose, L-cistine, natriumchloride, natriumtioglycolaat, rust en piek in een kleine hoeveelheid in een kleine hoeveelheid in een kleine hoeveelheid.

Er zijn verschillende versies van dit medium, waaronder: tioglycolaatbouillon met indicator, tioglycolaatbouillon zonder indicator, tioglycolaatbouillon met een rijkelijke indicator met hemine en vitamine K_1, En tioglicolaatbouillon met calcisch carbonaat.

Opgemerkt moet worden dat de variant van Tioglycate -bouillon verrijkt met hemine en vitamine K dient om de groei van veeleisende strikte anaeroben te verbeteren, en de variant van tioglycolaatbouillon die calciumcarbonaat bevat, is nuttig om de geproduceerde zuren tegen te gaan die worden geproduceerd tijdens microbiële groei.

[TOC]

Basis

Tioglycolaatbouillon wordt beschouwd als een verrijking, niet selectief, omdat het de ontwikkeling van de meeste niet -behoudende bacteriën mogelijk maakt. Voedingsvereisten worden geboden door gistextract, pancreas verteerd en glucose.

Aan de andere kant bevat dit medium, ondanks dat het een bouillon is een kleine hoeveelheid agar; Dit veroorzaakt een laag oxide-reductiepotentieel, omdat de zuurstofremmen, zodat zuurstof afneemt naarmate het in de buis wordt verdiept.

Dat is de reden waarom dit medium ideaal is voor de ontwikkeling van optionele aerobe bacteriën, microaerofielen en strikte anaërobe, deze laatste 2 zonder te incuberen onder deze omstandigheden. Hetzelfde medium reguleert de hoeveelheid zuurstof in de omgeving, afwezig aan de onderkant van de buis en in voldoende hoeveelheid op het oppervlak.

Kan u dienen: fenylalanine: kenmerken, functies, biosynthese, voedsel

Evenzo fungeren tioglycolaat en L-cistine als reducerende middelen, wat bijdraagt ​​aan de preventie van de accumulatie van stoffen die schadelijk zijn voor bacteriële ontwikkeling, zoals peroxide. Bovendien bevatten deze verbindingen sulfidrils (-sh-) groepen, waardoor de remmende effecten van kwikderivaten, arseen, onder andere zware metalen neutraliseren, neutraliseren.

Aan de andere kant is rusteloosheid een oxide -reductie -indicator. Deze stof is kleurloos wanneer deze wordt gereduceerd en roze wanneer deze wordt geoxideerd. Er zijn de varianten van tioglicolaatbouillon met indicator en zonder indicator. Het gebruik ervan is afhankelijk van het type monster- en laboratoriumvoorkeur.

Ondertussen handhaaft natriumchloride de osmotische balans van de tioglycaatbouillon en het gebruik van anhydra -glucose voorkomt overtollig vocht in de gedehydrateerde omgeving.

Voorbereiding

Tioglycolaatbouillon met indicator

Weeg 29,75 gr van het uitgedroogde medium en lost op in 1 liter gedestilleerd water. Het mengsel blijft ongeveer 5 minuten achter. Breng een warmtebron en roer regelmatig totdat deze volledig oplost.

Giet het medium in testbuizen en autoclavaat gedurende 15 minuten bij 121 ° C. Laat afkoelen voor gebruik. Controleer de insert van het commerciële huis op het behoud. Sommigen raden aan om op kamertemperatuur op kamertemperatuur te sparen, en anderen in de koelkast beschermd tegen licht.

De voorbereide medium pH is 7,1 ± 0,2.

De kleur van het gedehydrateerde medium is licht en bereid beige is een heldere barnsteen met enige opalescentie.

Tioglycolaatbouillon met hemine- en vitamine K -indicator₁

Er zijn commerciële media die al Hemina en vitamine K brengen₁, Speciaal voor anaërobe teelt.

Als u geen verrijkt medium voor anaëroben hebt, kan de basisbouillon van tioglycola worden voorbereid. Om dit te doen, worden 10 mg heminehydrochloride en 1 mg vitamine K toegevoegd₁ Voor elke liter medium. Als echter bloed of serum wordt toegevoegd aan de tioglycolaatbouillon, is de toevoeging van hemine, vitamine K niet nodig.

Kan u van dienst zijn: intra -specifieke concurrentie: kenmerken, typen en voorbeelden

Tioglycolaatbouillon met calciumcarbonaat

Komt commercieel en bereidt zich voor op het volgen van de instructies van het inzetstuk.

Tioglycolaatbouillon zonder indicator

Dit heeft dezelfde samenstelling van het basis Tioglycate, maar bevat geen resazurine.

Weeg 30 gr van uitgedroogd medium en lost op in een liter gedestilleerd water. De rest van de voorbereiding is gelijk aan die beschreven in de Tioglycate -bouillon met indicator.

Gebruik

Tioglycolaatbouillon is nuttig voor de verrijking van klinische monsters, vooral voor die van steriele sites. Het is ook handig voor niet -klinische monsters, zoals cosmetica, medicijnen, enz.

Voor de inoculatie van vloeibare monsters (zoals CSF, onder andere synoviale vloeistof) zijn de monsters eerste centrifugeren en worden vervolgens 2 druppels van het sediment genomen en geplaatst in de tioglycolaatbouillon. Incubeer gedurende 24 uur bij 35 ° C. Als er op dit moment geen groei is (troebelheid), wordt het maximaal 7 dagen geïncubeerd.

Als het monster met Hiopus wordt ingenomen, worden de kweekmedia eerst in platen geïnoculeerd en uiteindelijk wordt het wattenstaafje in de bouillon geïntroduceerd, het gedeelte dat opvalt en de buis is bedekt, waardoor het wattenstaafje binnen blijft. Incuba bij 35 ° C gedurende 24 uur, 7 dagen maximaal.

Voor vaste monsters moet het worden gehomogeniseerd in fysiologische zoutoplossing (SSF) -oplossing en vervolgens de tioglycolaatbouillon met 2 druppels van de suspensie inoculeren.

Soms kan het worden gebruikt als transportmiddel voor monsters waarbij de aanwezigheid van strikte anaëroben of als back -upverrijkingsbouillon wordt vermoed.

De tioglycolaatbotvariant met calciumcarbonaat wordt gebruikt voor het behoud van controles voor een langere tijd, omdat het de mogelijkheid heeft om de zuren te neutraliseren die worden geproduceerd door het gebruik van glucose; Deze zuren zijn giftig voor bepaalde bacteriën.

Groei in de tioglycolaatbouillon zal worden waargenomen vanwege de troebelheid van de omgeving. Het wordt aanbevolen om een ​​gramkleuring uit te voeren en vervolgens subjectief in niet -selectieve en selectieve media, afhankelijk van het type monster en de micro -organismen waarvan ze worden vermoed.

QA

Voor steriliteitscontrole wordt aanbevolen om een ​​of twee bouillons te incuberen zonder te inoculeren. Het verwachte resultaat is een transparante bouillon, zonder kleurverandering, hoewel het normaal is dat een lichte roze kleur op het buisoppervlak wordt waargenomen.

Het kan je van dienst zijn: Marine Meadow: wat is, kenmerken, flora, fauna

Voor kwaliteitscontrole, tussen 10 - 100 UFC van gecertificeerde bedieningselementen, zoals Staphylococcus aureus ATCC 6538, Micrococcus luteus ATCC 9341, Bacillus subtilis ATCC 6633, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Clostridium sporogenes ATCC 19404, Clostridium sporogenes ATCC 11437, Vulgatus bacteroïden ATCC 8482.

Incubeer bij 30-35 ° C in aerobiose gedurende 24 uur tot maximaal 3 dagen, omdat deze micro-organismen snel groeien.

In alle gevallen wordt een goede ontwikkeling verwacht, met uitzondering van Micrococcus luteus En Bacillus subtilis, waar er een matige ontwikkeling kan zijn.

Voor de kwaliteitscontrole van de tioglycolaatbouillon verrijkt met hemina en vitamine k₁, Controlestammen kunnen worden gebruikt Vulgatus bacteroïden  ATCC 8482, Clostridium perfringens ATCC 13124 en Fragilis bacteroïden ATCC 25285. Het verwachte resultaat is een bevredigende groei.

aanbevelingen

-Soms is te zien dat het oppervlak van de tioglycaatbouillon met indicator roze wordt; Dit komt door de oxidatie van de omgeving. Als de roze kleur 30% of meer van de totale bouillon kan worden verwarmd in een waterbad gedurende 5 minuten, weer afkoelen en gebruikt.

Dit zal geabsorbeerde zuurstof elimineren, het medium terugbrengen naar zijn oorspronkelijke kleur. Deze procedure kan maar één keer worden uitgevoerd.

-Om de groei van aerobe bacteriën te verbeteren, moet het worden geïncubeerd met het enigszins luie deksel. Het heeft echter de voorkeur om voor dit doel een infusiebouillon hersen hart of drievoudige sojabouillon te gebruiken voor de goede ontwikkeling van strikte aerobe.

-Het bevriezen van de omgeving of oververhitting moet worden vermeden, omdat beide voorwaarden het medium beschadigen.

-Direct licht beschadigt het kweekmedium, het moet worden beschermd tegen licht.

Referenties

1. Britania Laboratories. Usp tioglycolaat met indicator. 2015. Beschikbaar op: Labbritania.com.
2. Quos Sas Laboratories. 20199999999999999999999999999999999999999111 2019 2019 20199999 E moetene9999191999998311133113331322111152222222111231311111111111122111111111121111111111111111111111111111 -11111111111a's11111a's1a's1a's1a's1a's1a's D1a's Dam dat ’TO. Tioglycolaatbouillon. Beschikbaar bij: Quios.com.co
3. BD Laboratories vloeistof Thioglycollatemedium (FTM). 2003. Beschikbaar op: BD.com/Europa
4. BBL -media bereid in buizen voor de teelt van anaërobe micro -organismen. Tioglycate media. 2013. Beschikbaar op: BD.com
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld a. (2009). Bailey & Scott microbiologische diagnose. 12 ed. Pan -Amerikaanse redactionele s.NAAR. Argentinië.