Safranine -kenmerken, gebruik, technieken, toxiciteit

De Safranine Het is een meriquinoïde kleurstof, genoemd naar het bezitten van zijn chemische structuur van 2 benzeenringen en 2 kinoïde ringen, de laatste is degenen die de rode kleur geven.

Het wordt ook Safranine of Basic Red Dimethyl in zijn samenvattende vorm genoemd, omdat de wetenschappelijke naam 3,7-diamino-2,8-dimethyl-5-fenyl-fenyl-fenyll is_twintigH₁₉N₄ Klet.

Chemische structuur van safranine die de benzeen- en chinoïde ringen/ waterige oplossing van safranine aangeeft. Bron: Neurotoger [Public Domain] bewerkt door MSC. MARIELSA GIL/LHCHEM [CC BY-SA 3.0 (https: // creativeCommons.Org/licenties/by-sa/3.0)]

Er is een variant genaamd trimethyle-safranine, maar er is geen significant verschil tussen beide stoffen.

Safranine is een monochromatische kleurstof en, volgens de kenmerken van de chemische formule, is het een positieve ladingsstof. Daarom heeft het affiniteit met negatief geladen structuren. Deze structuren zullen rood worden geverfd.

Deze eigenschap geeft toepasbaarheid in veel histologische technieken om verschillende cellulaire structuren te verven, zowel van eukaryotische als prokaryotische organismen.

Safranine wordt gebruikt als een contrastverf in belangrijke en goed bekende technieken voor routine -gebruik in bacteriologie. Deze technieken zijn: Gram-Hucker's kleuring, Schaeffer Fulton-kleuring voor sporen of bacteriële capsules, onder andere, onder andere.

[TOC]

Kenmerken

De kleur van saffraan (kruiden verkregen uit de stigma's van de bloem van Crocus sativ) was de inspiratie om de naam van deze kleurstof te plaatsen. Uit de term komt saffraan de naam Safranine. Dat te wijten is aan de grote gelijkenis tussen de kleur van saffraan en de kleuring die deze kleurstof biedt.

Safranine wordt bereikt als kristallen of poeder, beide presentaties zijn oplosbaar in water. Safranine Dye heeft geen geur. Vlekken rode structuren. Structuren die de Safranine -kleurstof aantrekken, worden safranofielen genoemd.

Structureel is de safranine complex, hij heeft twee benzeenring aan de uiteinden en in het midden bevinden de twee kinoïde ringen zich waar kation n zich bevindt⁺. Het centrum van de structuur is het systeem dat verantwoordelijk is voor het geven van kleur. Door dit kenmerk wordt deze kleurstof geclassificeerd binnen categorie II.

Gebruik

Safranine wordt gebruikt om verschillende structuren te verven. Vooral benadrukt Kulchitsky's cellen die aanwezig zijn in het maagdarmkanaal, ook wel Enterocromofines -cellen genoemd.

Het is in staat om micro -organismen van het gezin te verven Rickettsiaceae. Evenzo wordt het gebruikt in verschillende technieken, zoals de methode van Koster, een gemodificeerde die wordt gebruikt voor het kleuren van genderbacteriën Brucella.

Aan de andere kant wordt de Safranine gebruikt in de kleurtechniek van Schaeffer Fulton-sporen en in de vlekken van Gram-Hucker. In beide technieken werkt Safranine als een contrastverf.

Kan u van dienst zijn: Indian

In de eerste nemen de sporen de kleur van het groen van malachiet en de rest van de structuren zijn rood door de safranine. In de tweede verliezen gram negatieve bacteriën de kleur van het violette glas in de verkleuringsstap, daarom is de safranine degene die de gram negatieve bacteriën van rood bevlekt.

Bovendien wordt safranine in bacteriologie gebruikt om Brucella -agar te bereiden met een 1: 5000 safranine -verdunning. Dit medium dient om de soort te onderscheiden Brucella Suis van de rest van de soort. Brucella melitensis En Brucella Abortus groeien in dit medium maar B. SUIS Het wordt geremd.

In het agro -industrieel veld is de safranine gebruikt bij 2,25% en 1:10 verdund tot kleurstofstammonsters van de suikerrietplant.

Deze plant wordt vaak getroffen door bacteriën Leifsonia Xyli Subs. Xyli, die de xilema van de plant beschadigt. Gile stengels worden geëvalueerd om de functie van de xyleemvaten te bepalen.

Technieken op het gebied van bacteriologie

Castañeda -kleuring voor R -vlekIckettsia

Een bloed- of weefseluitslag wordt in een bufferoplossing geplaatst (fosfaatdemping pH 7,6). Het is toegestaan ​​om spontaan te drogen en vervolgens gedurende 3 minuten bedekt met methyleenblauw en gecontracteerd met safranine. Rickettsias gekleurd blauw, in tegenstelling tot de rode achtergrond.

Gemodificeerde Koster -kleuring voor Brucella

Een uitstrijkje wordt uitgevoerd en flamea in de lichter voor fixatie. Vervolgens is het bedekt met een mengsel van 2 delen verzadigde waterige safranine met 3 delen KOH 1 mol/L -oplossing, gedurende 1 minuut. Een wassen met gedestilleerd water wordt uitgevoerd en 1% fenado methyleenblauw.

Als het monster genderbacteriën bevat Brucella Deze zullen oranje worden waargenomen in een blauwe achtergrond.

Bacteriële capsules vlekken

Een mengsel van bacteriële suspensie met Chinese inkt wordt uitgevoerd en safranine wordt toegevoegd. Een roodachtige halo zal worden waargenomen bij de microscoop rond elke bacteriële capsule met een zwarte achtergrond.

Kan u van dienst zijn: pure stoffen

Kleuring van sporen Schaeffer Fulton

Een uitgebreid met de bacteriële suspensie wordt uitgevoerd. Dan wordt het opgelost om te verwarmen. Het is bedekt met 5%malachietgroen, vaak flametend tot de emissie van dampen. Het proces wordt 6-10 minuten herhaald. Ten slotte wordt het gewassen met water en gedurende 30 seconden ingehuurd met 0,5% safranine. De bacillen zijn rood geverfd en de groene sporen.

Gram-Hucker-vlekken

Een uitgebreide met bacteriële suspensie wordt uitgevoerd en bevestigd aan warmte. De lamina met violette glas met 1 minuut is bedekt. Dan wordt Lugol per 1 minuut als een bijtende oplossing geplaatst. Vervolgens wordt het verkleurd met acetonalcohol en uiteindelijk 30 seconden aangenomen met Safranine.

Gram Positieve bacteriën zijn geverfd blauw violet en gram negatieve bacteriën van rood.

Sommige laboratoria zijn gestopt met het gebruik van de gram-hucker-techniek om de gemodificeerde gram-kopeloff-techniek over te nemen. In het laatste geval wordt safranine vervangen door fundamentele fuchsin. Dit komt omdat Safranine zwak soorten geslachten bevlekt Legionella, Campylobacter En Brucella.

Technieken in het histologiegebied

Kulchitsky -celkleuring (enterocromofines)

De weefselsneden van het maagdarmkanaal met zilverchloride worden geverfd. Dan wordt het verkleurd met natriumthiosulfaat en uiteindelijk aangenomen met safranine.

Kulchitsky -cellen worden onderscheiden omdat ze worden gepresenteerd met zwartachtige bruine korrels.

Kleuring voor artrose detectie

Safranine omdat het een positieve belasting heeft, bindt carboxy- en sulfaatgroepen van glycosaminoglycanen zeer goed. Deze maken deel uit van de proteoglycanen die een articulair kraakbeen vormen. In die zin, bij het sterven met safranine of kan worden geïdentificeerd of er een verlies van kraakbeen is of niet.

Verlies van kraakbeenweefsel kan worden gemeten door de Mankin -schaal of ook wel osteoartritis schaal genoemd.

De techniek wordt vervolgens uitgelegd: de histologische snede wordt ondergedompeld in een dienblad met de ijzerhematoxyline -oplossing van Weigert, en wordt vervolgens door zure alcohol geleid en gewassen met water.

Ga door met het kleurproces door het vel onder te dompelen in snelgroen, wassen met azijnzuur en nu onderwerpen in safranine of. Om het proces te voltooien, wordt het uitgedroogd met behulp van alcoholen in verschillende concentraties in oplopende volgorde. De laatste stap vereist xileno of xilol om het monster te verduidelijken.

Kan u van dienst zijn: metalloïden

De vellen zijn geconditioneerd met Canada Balm of vergelijkbaar om te worden waargenomen bij een microscoop. 

Met deze techniek zijn de kernen zwart geverfd, het groene bot en het kraakbeen waar de rode proteoglycanen worden gevonden.

Tincion voor de identificatie van macroalgas

Pérez et al in 2003 stelden een eenvoudige en economische techniek voor om de macroalgas te verven. Monsters worden bereid in histologische sneden met paraffine. De sneden worden ingesteld met 1% glycerine, waardoor ze volledig droog zijn. Dan wordt het in xylol geplaatst om paraffine te elimineren.

De snede wordt gerehydrateerd, waardoor het een reeks trays passeert die ethanol bevatten in verschillende concentratiegraden (dalende volgorde), gedurende 2 minuten in elk.

Vervolgens wordt het 5 minuten geverfd met een 3: 1 -mengsel van 1% safranine met 1% toluidineblauw, beide bereid met 50% ethanol. Het mengsel wordt drie druppels picrinezuur toegevoegd die als een mordant fungeert.

Dan wordt het opnieuw uitgedroogd door de alcoholbakken, maar deze keer stijgen. Ten slotte wordt het verduidelijkt met Xilol en het monster wordt bereid met Canada Balms.

Toxiciteit

Gelukkig is Safranine een kleurstof die geen gevaar vormt voor degenen die het manipuleren. Het is een onschadelijke kleurstof, het is niet carcinogeen en is ook niet brandbaar.

In direct contact met de huid of slijmvliezen kan een lichte roodheid van het gebied veroorzaken, zonder grote complicaties. Hiervoor wordt aanbevolen om het getroffen gebied met veel water te wassen.

Referenties

1. Garcia H. Safranine kleurstof of. Gezondheidstechniek, 2012; 1 (2): 83-85. Beschikbaar op: Medigraphic.com
2. Gil M. Gramkleuring: fundering, materialen, techniek en gebruik. 20199999999999999999999999999999999999999111 2019 2019 20199999 E moetene9999191999998311133113331322111152222222111231311111111111122111111111121111111111111111111111111111 -11111111111a's11111a's1a's1a's1a's1a's1a's D1a's Dam dat ’TO. Beschikbaar bij: Lofede.com
3. Gil M. Vlekken van sporen: fundering, technieken en gebruik. 20199999999999999999999999999999999999999111 2019 2019 20199999 E moetene9999191999998311133113331322111152222222111231311111111111122111111111121111111111111111111111111111 -11111111111a's11111a's1a's1a's1a's1a's1a's D1a's Dam dat ’TO. Beschikbaar bij: Lofede.com
4. Safranine." Wikipedia, gratis encyclopedie. 7 maart 2017, 10:39 UTC. AGO 2019, 20:49 is.Wikipedia.borg
5. Pérez-Cortéz S, Vera B, Sánchez C. Nuttige kleurtechniek in de anatomische interpretatie van Graciliasis Tenuiifrons En Gracilaria chilensis (Rhodophyta). Bot Act. Venez. 2003; 26 (2): 237-244. Beschikbaar bij: Scielo.borg.
6. Aleika Church, Peralta Esther Lilia, Alvarez Elba, Milián J, Matos Madyu. Verhouding van de functionaliteit van de xyleemvaten en de aanwezigheid van Leifsonia Xyli Subp. Xyli. Revisie. VEG -bescherming. 2007; 22 (1): 65-65. Beschikbaar bij: Scielo.Sled