Orceína Foundation en voorbereiding

De Orcein Het is een natuurlijke paarse kleurstof, geëxtraheerd uit verschillende korstmossen zoals: orchilla of urchilla, vruchtbaar korstmosen, Rocella Tincoria En Parella Lecanora grotendeels. De Rocella Tincoria Het wordt gevonden in het Afrikaanse en Amerikaanse continent, hoewel het kan worden vervangen door andere soorten in Europa.

Deze kleurstof wordt sinds de oudheid veel gebruikt in cytogenetische studies. In die zin werd de bereiding van orcein dat azijnzuur omvat, geïntroduceerd door Lacourt in 1941, dus het werd aanvankelijk de Lacourt -techniek genoemd.

Chemische structuur van orceine en orceïne -oplossing. Bron: Wikipedia.Org/ oguenther bij van.Wikipedia (dr. Guenther) [Public Domain]

Evenzo is het vanwege zijn eenvoud en lage kosten gebruikt voor de productie van lakmus (kleurplaten geëxtraheerd uit korstmossen) en in histologische studies (cel- en weefselkleuring).

Verschillende studies hebben deze kleuring gebruikt in combinatie met andere chemicaliën, zoals ammoniakale picrocarminat en azijnzuur, om respectievelijk elastische vezels en chromosomen te verven. Momenteel blijft orcein overgebleven in cytogenetische studies van dieren en groenten.

Onlangs, Silva et al. 2017 gebruikte deze vlek met succes om de verschillende veranderingen te observeren die optreden in de elastische vezels van de huid van de duim bij Chileense oudere volwassenen. Deze studie onthulde hoe vezels van de duim worden gewijzigd met veroudering.

In deze zin werden de elastische vezels waargenomen van bruine-negrzco-kleur in individuen gedurende 80 jaar; Terwijl ze in de jongste (van 60 jaar) kunnen worden gezien met roodachtig bruin. Cytoplasma en andere celstructuren worden geelachtig groen.

Dit liet het toe om de aanwezigheid en toestand van de elastische vezels te bevestigen, in termen van hun beschikking, kwantiteit en integriteit. Aan de andere kant is er ook op gewezen dat orcein nuttig is om onder andere aneurysma's te identificeren en arteritis te diagnosticeren.

[TOC]

Basis

Orcein maakt deel uit van de oxazinegroep van kleurstoffen en kleuring is gebaseerd op zijn affiniteit voor DNA. De kleurstof sluit zich aan bij de negatieve belasting van dit molecuul, voorgesteld door de fosfaatgroep. Daarom zijn chromosomen paars geverfd.

Het kan u van dienst zijn: Alilo: Allyic Unit, carbocatie, radicaal, voorbeelden

De rest van de celstructuren nemen echter een andere kleur. In het bijzonder, in het geval van elastische vezels, zijn deze gekleurd van een roodachtige bruine kleur, celkernen van een blauw violetblauw, terwijl collageen niet is geverfd.

Daarom wordt orcein gebruikt om chromatine te verven en seks te differentiëren in sommige vliegen van vliegen. Evenzo kunnen kernen en sommige leverinsluitingen geproduceerd door hepatitis B -antigenen kleur zijn.

Orcein -oplossingen hebben specifieke functies bij het vlekken. Orcein A, heeft de functie van het verzachten van celmembranen, waardoor hun dood wordt veroorzaakt en het proces van verdeling van hetzelfde verlamt. Ondertussen is Orcein B verantwoordelijk voor het voltooien van de kleur voor zijn hechting aan chromosomen.

Voorbereiding

1% Aceto-orceine-oplossing

Om een ​​oplossing van 1%-of-orcein voor te bereiden.

Vervolgens wordt het constant gemengd om de oplossing te homogeniseren, om later te laten staan ​​totdat het afkoelt. Eindelijk wordt 4ºC opgeslagen in donkere potten. Deze preparaat werd gebruikt door Flores 2012, voor de observatie van de rijpingsfasen van koeien eicellen.

In dit geval wordt bijvoorbeeld de aceto-occeïne-oplossing op het weefsel dat eerder in azijnstanolzuur gedurende 24 uur is gefixeerd, geplaatst. Dit kleurproces wordt 30 minuten uitgevoerd en vervolgens wordt de stof onderworpen aan verkleuring.

Evenzo kan dit worden gebruikt bij de identificatie van organellen in meercellige weefsels. In dit geval wordt een uitstrijkje van het orale slijmvlies met een druppel van de aceto-occeïne-oplossing geverfd, de bedekking wordt op het blad geplaatst en onmiddellijk kan de celkern worden waargenomen met zijn substructuren.

Lacto-proportion-oplossing orcein 1%

Bovendien kan orceine worden bereid met andere chemicaliën zoals melkzuur en propionzuur. Om dit te doen, lost een gram orceine op in een pre -omgevingen bij kamertemperatuur van 23 ml melkzuur en 23 ml propionzuur; het volume voltooien met gedestilleerd water tot 100 ml.

Kan u van dienst zijn: Tertiaire alcohol: structuur, eigenschappen, voorbeelden

Met deze lacto-propionische oplossing orceína kunt u de verschillende fasen van de meiotische verdeling van plantencellen zien. In dit geval wordt het eerder geprefereerde en gehydrolyseerde monster gedurende 15 minuten in de lacto-propionische orceïne-oplossing geplaatst en strekt vervolgens het weefsel uit in schuifplakken.

In de Duke -studie van 2016 over polythenische chromosomen gebruikte het een bereiding van 2 gram orceïne verdund in azijnzuur en 85%melkzuur, verdunnen met een 65%azijnzuuroplossing. Ten slotte observeerde hij de chromosomen in de speekselklieren van de Drosophila Melanogaster.

Orcein a en orcein B

Het is belangrijk om in gedachten te houden dat, afhankelijk van het monster en wat u wilt evalueren, de juiste Orcein -oplossing is voorbereid. Aldus wordt bijvoorbeeld de orceine -oplossing A 1N zoutzuur toegevoegd voor de observatie van divisiecellen.

Terwijl de oplossing van orcein B, ontstaat uiteindelijk in 45% azijnzuur. Deze techniek vormt een verkorte methode voor kleuring en wordt in het algemeen gebruikt als een aanvulling op kleurchromosomale structuren.

Laatste overwegingen

Vanaf de afgelopen eeuwen, in landen van het Amerikaanse continent als Argentinië, kunt u korstmossen krijgen zoals: Lecanora, Parmelia En Umbilicaria, die geweldige bronnen van orcein zijn. Ook Europese gebieden zoals de Canarische eilanden, waren destijds grote producenten van de Orchilla.

Dit werd geëxporteerd naar andere steden van hetzelfde continent zoals Genua en landen zoals Engeland, terwijl Holland. Dus dit korstmos werd vervolgens verminderd totdat het op het punt stond te blussen.

Dit leidde tot de orchilla werd vervangen door andere planten door verven eigenschappen. De opkomst van synthetische kleurstoffen heeft echter bijgedragen aan de voltooiing van deze licen orcein -bron.

Kan u van dienst zijn: aluminium carbonaat: structuur, eigenschappen, gebruik

Dit was mogelijk dankzij COCQ, die in 1812 de synthese van de orcein beschreef, wetende dat dit wordt gesynthetiseerd door een fenolische verbinding die orcinol wordt genoemd. Desondanks is natuurlijke orcein echter nog steeds de favoriet.

Dit kan te wijten zijn aan het feit dat orcinol een zeer sterke geurverbinding is en wiens langdurige blootstelling kan leiden tot gezondheidsrisico's, zoals het verlies van het vermogen om geuren te detecteren. Deze schade aan de hypofyse kan van tijdelijk naar permanent overstappen, hoe hoger de tentoonstelling.

Referenties

1. Ortega L, García R, Morales C. “Toepassing van lacasen geproduceerd door schimmels voor afbraak van microbiologische kleurstoffen (Orcein en Violet Crystal)."Jongeren in de wetenschap 2. 2015; 633-637. Beschikbaar bij: Youngen.Ugto.mx.
2. Barcat J. Orcein en elastische vezels. Geneeskunde (Buenos Aires) 2003; 63: 453-456. Beschikbaar bij: Medicinabuenosaires.com.
3. Silva J, Rojas M, Araya C, Villagra F. Histologische kenmerken van de huid van het gezicht vliegen bij Chileense individuen met vervaging van het dactilogram. J. Morfol. 2017; 35 (3): 1107-1113. Beschikbaar bij: Scielo.Conyt.
4. Orrillo M, merideth b. "Potato reproductieve en cytogenetische biologie.”Potato International Center (CIP). Technische handleiding. Beschikbaar bij: onderzoek.Cip.Cgiar.org/
5. Bloemen f. "Teelt en rijping In vitro, van koeien eicellen (Bos Taurus) In de Boliviaanse altiplano."[Master's thesis]. Nationale Universiteit van de Altiplano, Puno-Peru; 2012. Beschikbaar op: Repository.een P.Edu.pe.
6. Hertog c. Polynische chromosomen: een blik op het fenomeen van endorredupplication. Nationale Universiteit van Colombia, Medellín; 2016. Beschikbaar op: Edu.
7. Camarena F. Cellulaire en moleculaire biologie. Oefenhandleiding. Autonome University of Baja California. 2017. Beschikbaar bij: vis.Ent.UABC.mx.
8. Fao/oiea. 2018. Handleiding om vliegen te onderscheiden van Anastrepha Ludens (Loew) Silvestres en normale stammeisjes ("bi-seksueel") en genetisch geslachtsstam (Tapachula-7), bestraald en zonder bestraling. Guillen Aguilar J.C, López Muñoz L, López Villalobos en.F en Soto García D. N. Voedsel- en landbouworganisatie van de Verenigde Naties. Rome, Italië, 95 pp.
9. Orcein. (2018, 30 november). Wikipedia, gratis encyclopedie. Datum van consult: 03:38, 31 juli 2019 is.Wikipedia.borg.
10. Merck Millipore. (2018, 16 juli). Microscopie orcein voor certistain -microscopie. Beschikbaar op: Merckmillipore.com