Wat zijn het lentivirus?

De Lentivirus, van het Latijn Lenti wat langzaam betekent, ze zijn virus dat een lange tijd, tussen maanden en jaren, van de initiële infectie tot het uiterlijk van de ziekte vereist. Deze virussen behoren tot het genre Lentivirus en retrovirus (familie Retroviridae), die een RNA -genoom hebben dat wordt getranscribeerd naar DNA door reverse transcriptase (TR).

In de natuur zijn het lentivirus aanwezig in primaten, ongeldigheden en kweeksels. In primaten zijn er bijvoorbeeld twee fylogenetisch gerelateerde lijnen: Apesficiency Immunodeficiency Virussen (SIV) en Humans Immunodeficiency Virussen (HIV). Beide zijn de agenten die verworven immunodeficiëntiesyndroom (AIDS) veroorzaken.

Bron: PhD Dre bij Engelse Wikipedia [CC BY-SA 3.0 (https: // creativeCommons.Org/licenties/by-sa/3.0)]

Lentivector, verkregen uit lentivirus, is veel gebruikt voor basisonderzoek in biologie, functionele genomics en genenherapie.

[TOC]

Fasen van de Retrovirus -levenscyclus

De levenscyclus van alle retrovirus begint met de vereniging van het organisme tot een specifieke receptor op het oppervlak van de cel, gevolgd door de internalisatie van het virus door endocytose.

De cyclus gaat door met de eliminatie van het virusdekking en de vorming van een viraal nucleoproteïne (VNC) -complex, dat bestaat uit virale genoom geassocieerd met virale en cellulaire eiwitten. De samenstelling van de complexe veranderingen in de tijd en is gerelateerd aan conversie, via TR, van het indringer -genoom in een dubbele DNA -propeller.

De integratie van het virusgenoom in dat van de cel zal afhangen van het virale genoomcapaciteit om de gastheerkern binnen te dringen. De reorganisatie van de VNC heeft een belangrijke import in de import naar de kern, hoewel belangrijke celeiwitten, zoals transportine-SR2/TNPO3, importine-alpha3 en importin7, ook de kern beïnvloeden.

Kan u van dienst zijn: kenmerken van levende wezens

Virale eiwitten, zoals integreren en transcriptiefactoren van de gastheercel, zoals LEDCF, zijn de sleutel in de integratie van virale genoom.

Dit gebruikt de machines van de gastheercel om virale eiwitten te transcriberen en te vertalen en virions te assembleren, ze in extracellulaire ruimte bevrijden.

Van lentivirus tot lentivector

Het retrovirusgenoom heeft drie open lezingen (MLA) voor verschillende virale elementen. Bijvoorbeeld Capsidia en Matrix (Gen grap), enzymen (Gen Pol) en wrap (gen versturen)).

De constructie van een virale vector bestaat uit de eliminatie van sommige wilde virusgenen, zoals die gerelateerd aan virulentie. Op deze manier kan een virale vector eukaryotische cellen infecteren, retro-transcriberen, integreren in het genoom van de eukaryotcel van de gastheer en de transgen tot expressie brengen (ingevoegde therapeutische gen) zonder ziekten te veroorzaken.

Een constructiemethode van lentivector is overgangstransfectie. Het is gebaseerd op het gebruik van virale minigenomen (constructen genoemd) die alleen de genen van belangstelling transporteren. Overgangstransfectie bestaat uit onafhankelijke constructie van constructen.

Sommige retrovectoren hebben alleen hoofdelementen voor de assemblage van virale deeltjes, niet -functionele retrovectors genoemd. Ze worden gebruikt om verpakkingscellen te transfecteren.

Vectoren met een transgene expressiecassette kunnen cellen (transductie) infecteren, transformeren en transgen tot expressie brengen.

Het gebruik van afzonderlijke constructen is bedoeld om recombinatiegebeurtenissen te voorkomen die het wilde fenotype kunnen herstellen.

Lentivector -technologie

De lentivectortechnologie heeft een breed gebruik in basisbiologie en translationele studies voor de overexpressie van transgenen stabiel, de editie van genen gericht op locatie, het tot zwijgen brengen van persistente genen, de modificatie van stamcellen, het genereren van transgene dieren en de pluripotente celinductie.

Kan u van dienst zijn: wat is orthogenese?

Lentivectors vormen eenvoudig te manipuleren en produceren van systemen. Ze zijn geïntegreerd onomkeerbaar en zeker het gastheergenoom. Infecteren cellen die al dan niet in verdeling zijn.

Ze tonen tropisme naar bepaalde stoffen, waardoor therapie wordt vergemakkelijkt. Ze brengen geen virale eiwitten tot expressie, dus ze hebben lage immunogeniteit. Ze kunnen complexe genetische elementen verzenden.

In basisonderzoek zijn op HIV gebaseerde lentivectoren gebruikt als interferentie -RNA -verzendsystemen (RNAi) om de functie van een specifiek gen te elimineren, waardoor interactie met verschillende andere kan worden bestudeerd.

Lentivector verkregen uit HIV

Aan het begin van de jaren 90 werden de eerste lentivectors gebouwd van de HVI-1, die nauw verwant is aan de SIV van chimpansee. HVI-1 is verantwoordelijk voor AIDS wereldwijd.

De eerste generatie lentivector heeft een aanzienlijk deel van het hiv -genoom. Inclusief genen Meid En Pol, en verschillende extra virale eiwitten. Deze generatie is gemaakt met behulp van twee constructies. Een van hen, die schip uitdrukt, levert verpakkingsfuncties. Een ander drukt alle MLA uit, met uitzondering van verzending.

De overdrachtsvector bestaat uit een expressiecassette gemarkeerd door twee soorten lange herhalingen (LTR) en genen die nodig zijn voor verpakking en reverse transcriptie.

De tweede generatie verpakkingsvectoren mist de meeste accessoire genen en behoudt Tat en Rev. Deze genen werden verwijderd in de derde generatie en geleverd door een vierde constructie.

Transfer -vectoren van de derde generatie zijn samengesteld uit twee verpakkingsconstructies. Men codeert Meid En Pol. Nog een encod Revisie. Een derde construct codeert voor de envelop, die is afgeleid van VSV-G. Degene die codeert voor het interesse -gen bevat LTT LTT geïnactiveerde sequenties om recombinatie te voorkomen.

Kan u van dienst zijn: wat is binomiale nomenclatuur?

In het laatste geval verhogen transcriptieregulerende elementen de prestaties van transfergenen.

Lentivector verkregen uit andere virussen

Het HIV-2-virus is nauw verwant aan de Magabey Gris Siv (SIV_GIJ), en is verantwoordelijk voor AIDS in West -Afrika. Uit dit virus zijn vectoren in de eerste en tweede generatie verkregen.

Vergelijkbaar met HVI-1, van de SIV_GIJ, van het EIAV (infectieuze anemie -virus), van het IVF (katachtige immunodeficiëntievirus) en het BIV (Bovine Immunodeficiency Virus (BIV) -vectoren van drie generaties zijn gebouwd. EIAV -gebaseerde vectoren zijn ontwikkeld voor klinisch gebruik.

Van het Caprine-artritis-idephalitis-virus (CAEV) zijn de eerste en derde generatie vectoren gebouwd. Terwijl van de IVR van African Green Monkey, zijn de eerste generatie vectoren gebouwd.

Referenties

1. Da silva, f. H., Dalberto, t. P., Beyer Nardi, n. 2006. Naast retrovirus-infectie: HIV voldoet aan gentherapie, genetica en moleculaire biologie, 29, 367-379.
2. Durand, s., Cimarelli, a. 2011. De binnenkant van de lentivirale vector. Virussen, 3: 132-159.
3. Márai, J., Chuah, m. K. L., Van den Drisssche, t. 2010. Recente ontwikkelingen in lentivirale vectorontwikkeling en -toepassingen. Moleculaire therapie, 18: 477-490.
4. Milone, m.C., O'Doherty, u. 2018. Klinisch gebruik van lentivirale vector. Leukemie, 32, 1529-1541.
5. Sakuma, t., Barry, m.NAAR., Ikeda, en. 2012. Lentivirale vectoren: Basic to Translational. Biochemical Journal, 443, 603-618.