Voorbereiding van cultuurmedia

De voorbereiding van cultuurmedia is een methode om micro -organismen te laten groeien, om ze te bestuderen

Wat is de voorbereiding van cultuurmedia?

De Voorbereiding van cultuurmedia Het is een routinematige methode die wordt gebruikt in laboratoria voor de groei van gewenste micro -organismen. De kweekmedia zijn solide, vloeibare of semi-vaste preparaten die alle benodigde voedingsstoffen voor de ontwikkeling van een microbiële populatie hebben.

Over het algemeen zijn de middelen om micro -organismen te cultiveren rijk aan eiwitten en aminozuren en bevatten meestal een component die de groei bevordert van het organisme dat je wilt bestuderen, zoals vitamines, bloed, serum, onder andere.

Er is geen middelen voor algemene of universele cultuur, omdat de samenstelling ervan varieert afhankelijk van de behoeften van het micro -organisme van belangstelling. Sommige bacteriën kunnen in elk kweekmedium worden ontwikkeld, maar anderen hebben speciale vereisten.

Waar bestaat het uit?

Micro -organismen, zoals schimmels en bacteriën, kunnen niet individueel worden bestudeerd vanwege hun microscopische grootte. Daarom moeten ze worden gecultiveerd in kunstmatige media die de aanzienlijke toename van de bevolking mogelijk maken.

Als we bijvoorbeeld bacteriën willen bestuderen, moeten we ze de juiste aandoeningen geven zodat ze zich kunnen verspreiden en een kolonie kunnen vormen (die met het blote oog kan worden waargenomen).

De voorbereiding van kweekmedia varieert sterk, afhankelijk van het type micro -organisme dat je wilt laten groeien. Voordat u het voorbereidt, is het noodzakelijk om de basisvoedingsbehoeften van het werkorganisme te kennen.

De meest voorkomende componenten die in gewasmedia worden gebruikt, worden hieronder beschreven om een ​​algemeen idee te hebben van de voorbereiding ervan:

Agar

Het wordt in gewassen gebruikt als een geleermiddel en voegt eraan toe wanneer een solide of semi -solid medium wordt gezocht. De eerste stollingsagent die in de media -voorbereiding werd gebruikt, was de gelatine, maar in 1883 werd de agar geïntroduceerd in de wereld van bacteriologie door W. Hessen.

De bacteriologische type agar heeft als hoofdcomponent een polysacharide van complexe gevolgen, geëxtraheerd uit algen. Deze verbinding wordt gebruikt als een verdikkingsmiddel van gemeenschappelijk voedsel, zoals ijs en jam.

Het is om verschillende redenen een zeer waardevol element in de microbiologie. Voornamelijk, omdat micro -organismen het niet kunnen afbreken, is vloeibaar bij een temperatuur van 100 ° C en blijft in een vloeibare toestand totdat ze 45 ° C of minder bereiken.

In het geval u een vast medium wilt voorbereiden, moet de agarconcentratie ongeveer 1,5%zijn, terwijl de semi -solids moeten worden bereid van 0,3 tot 0,5%.

Vloeistoffen

De teelt van pathogene organismen heeft lichaamsvloeistoffen nodig, zodat ze zich kunnen ontwikkelen zoals ze zouden doen in hun natuurlijke omgeving.

Kan u van dienst zijn: prothetische groep

Om deze reden wordt compleet of gedefibreerd bloed toegevoegd. De vloeistof wordt geëxtraheerd uit een gezond en, eenmaal gesteriliseerd dier, wordt toegevoegd in het kweekmedium.

Uittreksels

Ze worden verkregen uit verschillende dieronderdelen (zoals vlees of lever) of groente (zaden) en worden verwerkt om een ​​vast concentraat te verkrijgen in de vorm van pasta of stof.

De meest voorkomende zijn de extracten van gist, mout en vlees.

Peptonas

Deze organische verbindingen worden verkregen door enzymatische of chemie van dier- of plantenweefsels. Het doel is om rijke inhoud toe te voegen aan aminozuren, die de fundamentele eenheden van eiwitten zijn.

Schok absorbeerders

De "buffers", of schokabsorberende systemen, vermijden plotselinge pH -veranderingen en helpen het optimale bereik te behouden dat het organisme verdraagt.

De meeste organismen kunnen een pH van 7 goed ontwikkelen, hoewel sommige bacteriën de voorkeur geven aan alkalische media. Er zijn echter bacteriën die variaties van de pH tussen de waarden van 6 en 9 weerstaan.

Bij pH -gevoelige soorten wordt schade niet geproduceerd door de overmatige hoeveelheid waterstof- of hydroxylionen, maar door de toename van zwakke zuren of basen die de cel kunnen doordringen.

Evenzo worden pH -indicatoren toegevoegd om het te kunnen controleren en afwijkingen te voorkomen die worden veroorzaakt door fermentaties of andere processen.

Doelen

Het hoofddoel bij het voorbereiden van een kweekmedium is om alle benodigde componenten toe te voegen om de succesvolle ontwikkeling van het organisme dat wil worden geïsoleerd mogelijk te maken. De combinatie van effectievere componenten en voedingsstoffen om de gewenste middelen te bereiken, moet worden geïdentificeerd.

Zowel voorbereiding als mediumopslag zijn van cruciaal belang om een ​​succesvolle groei te garanderen, omdat deze stappen afhankelijk zijn van de samenstelling van de omgeving en de beschikbaarheid van voedingsstoffen.

Er moet rekening mee worden gehouden dat de teelt van micro -organismen een taak is die wordt beïnvloed door verschillende factoren die extern zijn voor de cultuuromgeving, zoals de intensiteit van ontvangen licht, temperatuur en zuurgraad of alkaliteit van het medium.

Daarom moet elk van deze variabelen in aanmerking worden genomen en rigoureus worden gecontroleerd.

Soorten media

Gebaseerd op de compositie

Op basis van de samenstelling zijn er drie hoofdtypen gewassen: natuurlijke of empirische, semi-synthetische en synthetische of chemische middelen.

Natuurlijke omgeving

In natuurlijke media is de exacte compositie onbekend. Deze omvatten ingrediënten zoals melk, verdund bloed, plantensappen, extracten en infusies van vlees en pepton.

Om economische redenen worden meestal lage kostencomponenten toegevoegd, zoals soja -extract, serum, melasse, enz.

Kan u van dienst zijn: ondersteuning: kenmerken, functies en voorbeelden

Semi-synthetische media

Het wordt de semi-synthetische genoemd als de samenstelling van hetzelfde gedeeltelijk bekend is. Elk medium dat agar bevat, is een semi-synthetisch medium.

Onder hen hebben we onder andere dextrose-aardappel, czapek-dox agar, havermout, vlees peptone greep, onder andere voorbeelden.

Synthetisch of chemisch gedefinieerd medium

In dit geval is de samenstelling van het medium - als voor de hoeveelheid koolstof, stikstof, zwavel, fosfor en elke andere groeifactor - volledig bekend - volledig bekend.

Het is erg handig als u reproduceerbare resultaten wilt verkrijgen voor andere onderzoekers.

Voor de zo -aangedane "micro -organismen met speciale groei -eisen" moet u de benodigde componenten toevoegen. Een voorbeeld van dit type zijn Lactobacillus.

Gebaseerd op het type micro -organisme

Op dezelfde manier is er een andere classificatie voor cultuurmedia op basis van het type micro -organisme dat erin kan groeien.

Volgens dit principe hebben we het volgende: Algemene middelen, verrijking, selectieve en differentials. Elk wordt hieronder beschreven:

Algemene middelen

Deze geven de ontwikkeling van een breed scala aan micro -organismen toe. Als een organisme speciale voorwaarden nodig heeft voor zijn groei, zal het zich niet met succes kunnen ontwikkelen in dit soort gewas.

Verrijkingsmedia

De verrijking betekent de voorkeur geven aan de groei van een bepaald type micro -organisme, maar er is geen substantie toegevoegd om te voorkomen dat andere soorten microben erin groeien.

Selectieve middelen

Ze zoeken onder andere de specifieke groei van een micro -organisme, noemen onder andere schimmels, bacteriën, protozoa. Om dit te doen, remmen ze de ontwikkeling van anderen.

Om dit doel te bereiken, kunnen sterfelijke chemische verbindingen worden toegevoegd voor een brede groep micro -organismen en onschadelijk voor de winst, of het toevoegen van energiebronnen die alleen door de gezochte microbe kunnen worden geassimileerd.

Selectieve media worden gebruikt wanneer medische monsters worden genomen om sommige pathogene micro -organismen te cultiveren. Hier is het noodzakelijk om de groei van pathogeen te bevorderen en de ontwikkeling van normale microbiële flora van de patiënt te remmen.

Bismut sulfietagar, bijvoorbeeld, maakt de groei van grampositieve bacteriën en een groot aantal bacteriën in de gastro -intestinale holte niet mogelijk.

Daarom wordt het gebruikt om de gram -negatieve bacteriën te cultiveren die tyfus veroorzaken, Salmonella Typhi, In fecale monsters.

Differentiaalmiddelen

Dit type gebruikt een diagnostisch kenmerk van het interessante organisme (bijvoorbeeld eigenaardigheden in zijn metabolisme) om ze te kunnen identificeren tegen een andere soort die in hetzelfde medium groeit.

Het kan u van dienst zijn: Transfases: wat zijn, functies, nomenclatuur, subklassen

Zowel differentiële media als selectieve middelen zijn zeer nuttig op het gebied van klinische microbiologie en volksgezondheid, omdat deze disciplines de aanwezigheid van specifieke micro -organismen gerelateerd aan pathologieën of slechte omstandigheden van hygiëne moeten detecteren.

U kunt indicatorsubstanties in het gewas toevoegen die een onderscheidende functie verlenen aan de gezochte kolonie. Bijvoorbeeld, aan de medium agar-eosine-rul van methyleen (afgekort EMB) en de agar-macconkey worden lactose en een pH-indicator toegevoegd.

Dus wanneer een kolonie zich in deze media ontwikkelt met het vermogen om lactose te gisten en aldehyden te produceren, kunnen ze worden waargenomen in een speciale kleur.

Stappen voor de voorbereiding van cultuurmedia

Momenteel kan de teelt kunnen worden gekocht op een gelyofiliseerde manier. Daarom wordt de voorbereiding vergemakkelijkt en blijft alleen het product over.

De inhoud moet zwaar zijn (rekening houdend met de uiteindelijke hoeveelheid die u wilt voorbereiden) en opgelost in gedestilleerd water na alle productindicaties.

De inhoud van de vloeibare media moet worden onderverdeeld in de gewenste containers (petrischalen, buizen, enz.) Voor daaropvolgende sterilisatie.

Om het vaste medium te verdelen, is het noodzakelijk om het te smelten met een magnetron of het materiaal in te dienen naar een waterbad. De middelgrote pH moet worden aangepast.

Meestal wordt de agar gebruikt in testbuizen of in petri -platen. Als de agar stolt in een hellende positie, met de juiste hoek voor de uiteindelijke terminalrand om diagonaal te zijn, staat deze bekend als fluit- of hellende pico -buizen.

Wanneer de agar stolt in een volledig verticale positie, krijgt deze de naam "diep".

Na het steriliseren van de media - met behulp van een autoclaaf - laten ze ze afkoelen. Deze moeten worden gemanipuleerd in een omgeving zonder micro -organismen, de meest voorkomende is om te werken met een lichtere ontsteking die zorgt voor een aseptische omgeving in zijn omgeving.

Referenties

1. Celis, J. EN. (2006). Celbiologie: een laboratoriumhandboek (Vol. 2). Elsevier.
2. Finegold, s. M., Bailey, W. R., Baron, E. J., FineGlod, s. M., & Scott, en. G. (1991). Bailey Scott: microbiologische diagnose. Pan -American Medical.
3. Olivas, E. (2004). Microbiologie en II en parasitologiepraktijken handleiding. Autonome University of Ciudad Juarez.
4. Schlegel, h. G., & Zaborosch, c. (1993). Microbiologie -generaal. Cambridge University Press.
5. Tortora, g. J., Funke, B. R., & Case, c. L. (2007). Inleiding tot microbiologie. ED. Pan -American Medical.