Half Stuart Foundation, voorbereiding en gebruik

Hij Half Stuart Het is een semi -solide agar of een bouillon zonder voedingsstoffen, gebruikt voor het transport van biologische monsters. Het doel is om de spanningen in de steekproef voor een bepaalde tijd te houden, maar zonder de microbiële populatie te vergroten.

Het werd gemaakt door Moffet, Young en Stuart in 1948 en vervolgens aangepast door Toshach en Patsula. Het is samengesteld uit natriumglyceofosfaat, natriumtioglycoaat, calciumchloride en agar-adding. De laatste is aanwezig in het semi -solide en afwezige medium in de vloeistof. Sommige laboratoria voegen methyleenblauw toe.

Culturette met Stuart -transport. Bron: door: CDC/DR. Gilda Jones, Courtesy: Public Health Image Library

Ze worden meestal gebruikt wanneer het niet mogelijk is om het monster onmiddellijk te zaaien. In dit geval wordt het monster in de vervoermiddelen geplaatst, terwijl het wordt overgebracht naar het laboratorium dat het gewas zal verwerken.

Op deze manier is het gegarandeerd dat de aanwezige micro -organismen in leven blijven totdat ze worden geïnoculeerd in de overeenkomstige kweekmedia.

Aanvankelijk was het gebruik ervan bestemd om urethrale of vaginale monsters te transporteren waar de aanwezigheid van Neisseria gonorrhoeae. Vervolgens realiseerden ze zich dat hun nut breder zou kunnen zijn.

Het Stuart -medium bleek zeer efficiënt te zijn in het behoud van labiele en irritante micro -organismen zoals zoals Neisseria Meningitidis, Hemophilus influenzae, Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae, Corynebacterium diphteriae, Bordetella pertusis, onder andere. Naast andere niet -annoyerende micro -organismen zoals Enterobacteria.

Het Stuart -medium vermijdt in feite de uitdroging van het monster, handhaaft de osmotische balans en behoudt micro -organismen tot een ideale pH. Aan de andere kant bevat strategisch dit medium geen voedingsstoffen, dit voorkomt dat micro -organismen zich niet vermenigvuldigen.

In de markt zijn er speciale shows voor het transport van monsters die dit of andere vervoermiddel bevatten, Culturette genoemd. Ze kunnen ook worden voorbereid in het laboratorium.

[TOC]

Basis

Het einde van het transportmiddel van de Stuart is om de monsters het dichtst bij de oorspronkelijke staat te houden, totdat deze wordt verwerkt.

Natriumglyceofosfaat en calciumchloride is een buffersysteem dat werkt door pH en osmolariteit te handhaven.

Terwijl het natriumtioglycate fungeert als een reductiemiddel en in het geval van het bevatten van dit geeft het de semi -solide consistentie, om de oxygenatie van de omgeving te vertragen. Ten slotte is methyleenblauw een oxidatie -indicator, dat wil zeggen, het detecteert de aanwezigheid van zuurstof.

Kan u van dienst zijn: glycosaminoglicanos: kenmerken en functies

Het semi-vaste medium met redox-indicator is ideaal voor het transport van monsters waarbij de aanwezigheid van anaërobe bacteriën wordt vermoed.

Kenmerken van de transportmiddelen

Het Stuart -medium voldoet, zoals elke transportmiddelen, voldoet aan bepaalde kenmerken, waaronder:

-Houd levensvatbaar de aanwezige microbiële stammen zonder zich te vermenigvuldigen.

-Het bevat geen voedingsstoffen; De verbindingen zijn bedoeld om het monster gehydrateerd te houden, in voldoende pH en osmolariteit.

-Remt de autolyzed van enkele delicate micro -organismen, zoals Pneumococcus.

-Het gebruik ervan is tijdelijk, het mag niet te veel worden uitgebreid.

Voorbereiding

Half semi-solid Stuart met redox-indicator

Zelfgemaakte voorbereiding

Ingrediënten

Natriumglyceofosfaat 10 gram

Natrium Tioglycoate 1.0 gram

Calciumchloride 0.1 gram

Methyleenblauw 0.002 GR

Agar -agar 3 gram

Gedestilleerd water 1 l

Meng de componenten en verwarm op tot de totale oplossing. Giet buizen of speciale escobillones in. Ze worden geïntroduceerd in de autoclaaf en worden 15 minuten gesteriliseerd bij 121 ºC. Laat de buizen verticaal afkoelen (in de vorm van een taco). Kamer bij kamertemperatuur.

Voorbereiding met commercieel medium

Weeg 14,1 gr van het medium in 1 liter gedestilleerd water. Verwarm vaak agiterend tot de totale oplossing, u kunt het laten koken. De rest van de procedure zoals reeds beschreven.

Het uitgedroogde medium is crème en bereid moet blauw zijn op het oppervlak. Dit komt door de aanwezigheid van methyleenblauw.

De pH van het medium moet worden ingesteld op 7,4 ± 0,2

Half gemodificeerde vloeibare stuart (zelfgemaakte voorbereiding)

Ingrediënten

Natriumglyceofosfaat 10 gram

Natrium Tioglycoate 1 gram

Calciumchloride dihydrated 0,1 gram

1000 ml gedestilleerd water

Het draagt ​​dezelfde ingrediënten als de semi-solid, maar het draagt ​​geen agar of methyleenblauw. In dit geval worden de componenten zonder verwarming gemengd en wordt 0,5 ml verdeeld in buizen van 16 x 125 mm met een draaddeksel.

Het steriliseert 10 minuten in autoclaaf bij 121 ° C. Voor monster nemen -sam.

Kan u dienen: Wiskundige biologie: geschiedenis, onderzoeksobject, toepassingen

De buizen worden opgeslagen bij kamertemperatuur.

Toepassingen

Commercieel zijn er speciale apparaten voor het transport van monsters genaamd Culturette; Dit apparaat is een langwerpige en dunne buis die een wattenstaafje binnenbrengt en uiteindelijk is er een segment dat het halfsolid of vloeibare Stuart -medium bevat.

Het apparaat opent en neemt met het wattenstaafje het monster. Vervolgens wordt het opnieuw in de buis geïntroduceerd totdat de punt van het wattenstaafje wordt ingebracht in het medium van semi-vast transport; Sommigen brengen een polyurethaanspons geïmpregneerd met vloeibare Stuart -medium, waarmee het monster wordt bewaard wanneer het nat blijft.

In het geval dat de aanwezigheid van delicate micro -organismen wordt vermoed, moeten katoenbailingen met steenkool in monster worden gebruikt.

De monsters die kunnen worden genomen met wattenstaafjes of bezems en overgebracht in dit medium zijn keelholte -exsudaten, rectale wattenstaafjes en verschillende secreties, waaronder: vaginale, urethralen, wonden, oculair, otic en abcessen.

Tijdens de overdracht van het monster in de vervoermiddelen naar het laboratorium, moet het indienen van de omgeving aan extreme omgevingscondities (zeer koud of zeer warmte) worden vermeden (zeer koud of zeer warmte). Plotselinge veranderingen in de atmosferische druk moeten ook worden vermeden.

De tijd waarin het medium in staat is om een ​​micro -organisme levensvatbaar te houden, hangt af van de betreffende spanning. Voor micro -organismen van het geslacht van het geslacht kunnen Neisseria's en Haemophilus bijvoorbeeld tot 24 uur levensvatbaar worden gehouden, maar stammen zoals Salmonella of Shigella kunnen dagen en tot weken duren.

Als wordt geschat dat de monsterverwerking meer dan 4 dagen kan duren, heeft het de voorkeur om het monster te bevriezen bij -70 ° C.

Monsteridentificatie in transportmiddelen

De voorbereide transportmedia of de commerciële cultuur moeten een label hebben waar de volgende gegevens worden geplaatst:

Naam en achternaam van de patiënt: Vermijd bemonstering verwarring.

Identificatie Nummer: Het is handig om een ​​bestelling op het werk te brengen.

Bron van voorbeeld: Help de bacterioloog voor de keuze van de juiste kweekmedia.

Kan u van dienst zijn: capsulekleuring: foundation en technieken

Behandelend arts: Soms is het noodzakelijk voor mogelijk overleg.

Datum en tijd van voorbeeld: Het is noodzakelijk voor de acceptatie of afwijzing van het monster volgens de tijd die is verstreken tussen het monster en de ontvangst in het laboratorium.

Andere informatie die zeer nuttig zou zijn om te bijlagen is:

De vermoedelijke diagnose: Gids bij de toevoeging van speciale cultuurmedia volgens diagnostische vermoeden.

Antibioticabehandeling: Het is handig om aan het antibiogram te worden bevestigd.

Al deze informatie is van vitaal belang om de goede verwerking van het monster te garanderen.

QA

Om de werking van het Stuart -medium te evalueren, kunt u bekende en onderhouden stammen bij 25 ° C inoculeren, zoals: Bordetella pertussis ATCC 9340, Hemophilus influenzae ATCC 19418, Neisseria gonorrhoeae ATCC 19424, Neisseria meningitidis ATCC 13090, Streptococcus pneumoniae ATCC 6301.

In alle gevallen wordt verwacht dat het het micro -organisme in kwestie herstelt, 24 uur bewaard gebleven.

Aan de andere kant, andere soorten zoals: Shigella flexneri ATCC 12022, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Streptococcus pyogenes ATCC 12344, Enterococcus faecalis ATCC 33186, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 en Escherichia coli ATCC 11775.

In alle gevallen wordt een overvloedig herstel verwacht tot 96 uur.

Beperkingen

Sommige studies zorgen ervoor dat glyceofosfaat aanwezig in de middelgrote Stuart kan worden gemetaboliseerd door sommige coliformen, onder andere gram negatieve bacteriën en daarom vermenigvuldigen in dit medium.

Dit risico neemt toe, hoe meer de verwerking van het monster wordt vertraagd. Evenzo beïnvloedt de tentoonstelling van het Stuart -medium bij hoge temperaturen tijdens de overdracht dit specifieke.

Referenties

1. “Midden in transport (microbiologie)." Wikipedia, gratis encyclopedie. 13 april 2018, 10:36 UTC. 1 april 2019. Beschikbaar op: dit.Wikipedia.borg
2. Microkit Laboratories: Culture Media. Stuart transportmedium. Beschikbaar op: Beschikbaar in: Culture Media.com
3. Lablisan. Stuart transportmedium. Beschikbaar op: Lablinsan.Klet
4. Wetenschappelijke MDM. De voordelen van het hebben van een gemiddelde microbiologisch transportstuart. Beschikbaar op: mdmcientify.com
5. Metrix Laboratories. Stuart. 2017. Beschikbaar op: Metrixlab.mx
6. Forbes B, Sahm D, Weissfeld a. (2009). Bailey & Scott microbiologische diagnose. 12 ed. Pan -Amerikaanse redactionele s.NAAR. Argentinië.
7. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Microbiologische diagnose. 5e ed. Pan -Amerikaanse redactionele s.NAAR. Argentinië.