Histochemistry Foundation, verwerking, vlekken

De Histochemie Het is een zeer nuttig hulpmiddel in de studie van de morfologie van verschillende biologische weefsels (groenten en dieren), vanwege het reactieprincipe van weefselcomponenten zoals koolhydraten, lipiden en eiwitten, onder andere met kleurstoffen kleurplaten.

Dit waardevolle hulpmiddel kan niet alleen de samenstelling en structuur van de weefsels en cellen identificeren, maar ook de verschillende reacties die hierin voorkomen. Evenzo, mogelijke weefselschade, veroorzaakt door de aanwezigheid van micro -organismen of andere pathologieën.

Histochemische kleuring. Nijlvirus, gram positieve en gram negatieve bacteriën (gram), histoplasma capsulatum (Grocott), Mycobacterium tuberculosis (Ziehl Neelsen). Bron: Pixinio.com/wikipedia.org/nefron [CC BY-SA 3.0 (https: // creativeCommons.Org/licenties/by-sa/3.0)]/cdc/dr. George P. Kubica [Public Domain]

Histochemie heeft sinds afgelopen eeuwen belangrijke bijdragen geleverd, zoals de demonstratie van het bestaan ​​van de bloedcelbarrière door Paul Ehrlich. Dit was mogelijk dankzij het feit dat de hersenen van het door Ehrlich gebruikte experimentendier niet verven met aniline, wat een basisverf is.

Dit leidde tot het gebruik van verschillende kleurstoffen zoals methyleen en indophenolblauw, om de verschillende soorten cellen te verven. Deze bevinding gaf aanleiding tot de classificatie van cellen in acidofiele, basofiele en neutrofielen, volgens hun specifieke kleuring.

Recente studies hebben deze techniek toegepast om de aanwezigheid van verschillende verbindingen aan te tonen, waaronder fenolen, evenals koolhydraten en niet -structurele lipiden bij de soort van de soort Litsea glaucescens, Het best bekend als Laurel. Zijn deze, zowel in het laken als in het hout.

Evenzo identificeerden Colares et al, 2016 de medicinale belangenfabriek TARENAYA HASSLERIANA, door histochemische technieken. In deze soort werd de aanwezigheid van zetmeel, mirosina, evenals fenolische en lipofiele verbindingen bewezen.

[TOC]

Basis

Histochemie is gebaseerd op de kleuring van cellulaire structuren of moleculen die in de weefsels aanwezig zijn, dankzij hun affiniteit met specifieke kleurstoffen. De kleurreactie van deze structuren of moleculen in hun oorspronkelijke formaat, wordt vervolgens gevisualiseerd in de optische microscoop of elektronische microscoop.

De specificiteit van kleuring is te wijten aan de aanwezigheid van ionen die groepen accepteren die aanwezig zijn in de cellen of weefselmoleculen.

Ten slotte is het doel van histochemische reacties om door kleur te kunnen bewijzen. Van de grootste biologische structuren tot de kleinste weefsels en cellen. Dit kan worden bereikt dankzij het feit dat de kleurstoffen chemisch reageren met de moleculen van de weefsels, cellen of organellen.

Het kan u van dienst zijn: wat is gastratie?

Vervolging

De histochemische reactie kan leiden tot stappen voorafgaand aan de realisatie van de techniek, zoals de fixatie, inclusie en snijden van het weefsel. Daarom moet rekening worden gehouden met dat u in deze stappen de structuur kunt beschadigen die u wilt identificeren, waardoor vals negatieve resultaten worden gooit, zelfs als deze aanwezig is.

Desondanks is de eerdere fixatie van het weefsel dat goed is uitgevoerd, omdat ze autolyse of celvernietiging voorkomt. Voor deze.

De opname van het weefsel wordt gedaan zodat het zijn stevigheid handhaaft bij het snijden en dus voorkomen dat het wordt vervormd. Ten slotte wordt de snit gedaan met een microtoom voor de studie van monsters door optische microscopie.

Bovendien wordt het aanbevolen om histochemische kleuring uit te voeren om externe of interne positieve controles in elke batch van tests op te nemen. Evenals het gebruik van specifieke kleurstoffen voor structuren om te bestuderen.

Histochemische kleuring

Van de opkomst van histochemische technieken tot heden, een breed scala aan kleurstoffen is gebruikt, waaronder het meest voorkomende gebruik zoals: Schiff (PAS), Grocott, Ziehl-Neelsen en Gram.

Evenzo zijn andere kleurstoffen minder vaak gebruikt, zoals Chinese inkt, orcein of Massons trichromische kleuring, onder andere.

Schiff's periódiczuur (PAS)

Met deze kleur kunt u moleculen zien met een hoog koolhydraatgehalte, zoals: glycogeen en mucine. Het is echter ook nuttig voor de identificatie van micro -organismen zoals schimmels en parasieten. Naast bepaalde structuren (basaal membraan) in de huid en in andere weefsels.

De basis van deze kleuring is dat de kleurplaten oxida de koolstofbindingen aanwezig zijn tussen twee nabijgelegen hydroxils -groepen. Dit produceert de release van de Aldehyde -groep, en dit wordt gedetecteerd door het Schiff -reagens, die een paarse kleur gooit.

Het Schiff -reagens bestaat uit basis fuchsine, natriummetabisulfiet en zoutzuur, deze componenten zijn verantwoordelijk voor paarse kleuren, wanneer de aldehydegroepen aanwezig zijn. Anders wordt een kleurloos zuur gegenereerd.

Kan u van dienst zijn: isomerase: wat is, functies, nomenclatuur, typen

De kleurintensiteit is afhankelijk van de hoeveelheid hydroxilli -groepen die aanwezig zijn in de monosachariden. Bijvoorbeeld in schimmels, basale membranen, mucinas en glycogeen kan de kleur van rood naar paars gaan, terwijl de kernen blauw zijn geverfd.

Kruidier

Het is een van de kleuring die de grootste gevoeligheid presenteert bij de identificatie van schimmels in weefsels opgenomen in paraffine. Dit maakt de identificatie van de verschillende schimmelstructuren mogelijk: hyfen, sporen, endosporen, onder andere. Daarom wordt het beschouwd als een routinematige kleuring voor de diagnose van Mycosis.

Vooral wordt het gebruikt bij de diagnose van longmycose zoals pneumocystose en aspergilose veroorzaakt door sommige genres Fungi Pneumocystis En Aspergillus, respectievelijk.

Deze oplossing bevat zilver en chroomzuurnitraat, de laatste is een fixeermiddel en kleurstof. De basis is dat dit zuur de oxidatie van de hydroxillen tot aldehydos produceert, door de mucopolys die aanwezig zijn in de geplande structuren, bijvoorbeeld in de celwand van de schimmels.

Ten slotte wordt het zilver in de oplossing geoxideerd door de aldehyden, die een zwarte kleuring veroorzaakt, die Argentafin -reactie wordt genoemd. U kunt ook contrastkleurstoffen gebruiken zoals lichtgroen en dus worden schimmelstructuren in het zwart met een lichtgroene achtergrond waargenomen.

Ziehl-Neelsen

Deze kleuring is gebaseerd op de aanwezigheid van zuur-alcoholweerstand, gedeeltelijk of totaal, in sommige micro-organismen zoals genres Nocardie, Legionella en Mycobacterium.

Het gebruik van deze kleuring wordt aanbevolen, omdat de celwand van de eerder geciteerde micro -organismen complexe lipiden bevat die de penetratie van kleur belemmert. Vooral in monsters voor luchtwegen.

Sterke kleurstoffen zoals fenicada fuchsine (basale kleurstof) worden erin gebruikt en warmte wordt toegepast zodat het micro -organisme de kleurstof kan behouden en geen verkleuring kan maken met zuren en alcoholen. Ten slotte wordt een methyleenblauwe oplossing toegepast om de verkleurde structuren te kleuren.

De aanwezigheid van zuur-alcoholweerstand wordt waargenomen in rode structuren, terwijl structuren die geen verkleuring weerstaan, blauw worden geverfd.

Gram en Chinese inkt

Gram is onder andere een zeer nuttige kleuring bij de diagnose van bacteriële en schimmelinfecties. Deze kleur maakt het mogelijk om onderscheid te maken tussen de gram -positieve micro -organismen van het negatieve gram, wat duidelijk de verschillen bewijst die bestaan ​​in de samenstelling van de celwand.

Kan u van dienst zijn: verafzuipbare lipiden: kenmerken, structuur, functies, voorbeelden

Terwijl Chinese inkt een kleuring is die wordt gebruikt om de structuren die polysachariden (capsule) bevatten te contrasteren. Dit komt omdat een ring zich in de omgeving vormt, mogelijk in de Cryptococcus neoformans.

Orcein

Met deze kleuring zijn elastische vezels en chromosomen van verschillende cellen gekleurd, waardoor het rijpingsproces van de laatste kan worden geëvalueerd. Om deze reden is het erg nuttig geweest in cytogenetische studies.

Dit is gebaseerd op de verzameling van de kleurstof door de negatieve belasting van moleculen zoals DNA, aanwezig in de centra van de grote verscheidenheid aan cellen. Dus deze zijn blauw geverfd tot donker violet.

Massons trichromic

Deze kleuring wordt gebruikt bij de identificatie van sommige micro -organismen of materialen die mellatische pigmenten bevatten. Dit is het geval van mycosis, veroorzaakt door dematische schimmels, ugohifomicose en in zwart korrel euumicetoom.

Laatste overwegingen

In de afgelopen jaren zijn er veel vooruitgang geboekt bij het creëren van nieuwe diagnostische technieken, waarbij histochemie betrokken is maar gekoppeld aan andere stichtingen of principes. Deze technieken nastreven een ander doel, zoals het geval is met immunohistochemie of enzymohistochemie.

Referenties

1. Acuña u, elfero j. Histochemie. Een. Chem. 2012; 108 (2): 114-118. Beschikbaar op: Are.IQM.CSIC.is
2. Mestanza r. Frequentie van de histochemische kleuring van PAS, Grocott en Ziehl-Neelsen die worden gebruikt voor de identificatie van micro-organismen, uitgevoerd in de pathologische anatomieservice van het Eugenio Espejo Specialties Hospital in 2015. [Bachelordhesis]. Centrale Universiteit van Ecuador, Quito; 2016. Beschikbaar op: DSpace.Uce.Edu
3. Tapia-Torres N, De la Paz-Pérez-Olvera C, Román-Guerrero A, Quintanar-Isaías A, García-Márquez E, Cruz-Sosa F. Histochemie, totale fenolengehalte en blad- en hout antioxiderende activiteit Litsea glaucescens Kunth (Laureaceae). Hout en bossen. 2014; 20 (3): 125-137. Beschikbaar op: Redalyc.borg
4. Colares, MN, Martínez-Alonso, S, Arambarri, Am. Anatomie en histochemie van Tarenaya Hassleriana (Cleomaceae), een soort medicinale interesse. Latijns -Amerikaans en Caribische bulletin van medicinale en aromatische planten 2016; 15 (3): 182-191. Beschikbaar op: Redalyc.borg
5. Bonifaz a. Basic Medical Mycology. 4e editie. Mexico: McGraw-Hill Inter-American Editors, S.NAAR. van C.V. 2012.
6. Silva Diego Filipe Bezerra, Santos Hellen Bandeira de Pontes, León Jorge Esquiche, Gomes Dalian. Kliniek pathologische en immunohistochemische analyse van spindelcel plaveiselcelcarcinoom van de tong: een zeldzaam geval. Einstein (São Paulo) 2019; 17 (1): ERC4610. Beschikbaar van: Scielo.BR