Salmonella-Shigella Agar
- 3426
- 1089
- Alton D'Amore
Hij Salmonella-Shigella Agar Ook bekend als SS Agar, is het een matig selectief en differentieel medium, speciaal ontworpen voor de isolatie van enteropathogene bacteriën van de Salmonella- en Shigella -genres, zowel van milieu- als klinische monsters.
De SS -agar heeft een complexe samenstelling; Het bestaat uit vleesextract, pepton, lactose, galzouten, natriumcitraat, natriumthiosulfaat, ijzersterkte, agar, neutraal rood, heldergroen en gedestilleerd water. Gezien de geweldige selectiviteit kunnen monsters worden gezaaid met overvloedige gemengde flora.
SS Agar met Salmonella SP -kolonies. Bron: manurx27 [CC BY-SA 4.0 (https: // creativeCommons.Org/licenties/by-sa/4.0)], van Wikimedia CommonsIn laboratoria van microbiologie wordt het Salmonella-Shigella-medium veel gebruikt om de aanwezigheid van Salmonella en Shigella te onderzoeken in monsters van diarree ontlasting, afvalwater, drinkwater en voedsel.
Soms is het nodig om pre-enrique bouillons (lactosado-bouillon) en verrijking (Selenito Cistina Broth) te gebruiken om Salmonella-stammen te herstellen.
Deze stappen zijn vereist wanneer het bestaan van Salmonella in een zeer lage hoeveelheid wordt vermoed, of waar de spanning kan worden mishandeld door industriële productieprocessen, voornamelijk bewerkte voedingsmiddelen. Het is ook raadzaam om ontlastingsmonsters te verrijken van patiënten die zijn behandeld met antibiotica.
Vervolgens kan de verrijkte bouillon worden gezaaid in Salmonella-Shigella Agar en in andere soortgelijke media, zoals Xilosa Agar, Lysina Desoxicolate (XLD) en Agar Hektoen Enteric (HE).
Basis
Elk onderdeel van de Salmonella-Shigella-cultuur heeft een specifieke functie en het mengsel als geheel biedt de eigenschappen die het karakteriseren.
Voedingskracht
Vleesextract en pepton (verteerd met dierenweefsel) bieden de vereiste voedingsstoffen (stikstof, koolstof en vitamines) voor de ontwikkeling van micro -organismen die de rest van de componenten kunnen verdragen.
Kan u dienen: Ribulosa: kenmerken, structuur en functiesSamenhang
De agar -agar is verantwoordelijk voor het bieden van solide consistentie aan het milieu.
Selectief
Dit medium is zeer selectief omdat het galzouten, natriumcitraat en felgroen bevat. Daarom remt het de groei van alle gram -positieve bacteriën en de meeste gram negatieve bacillen, inclusief enkele coliformen.
Terwijl de bacteriën van het geslacht Salmonella en enkele stammen van Shigella als ze deze verbindingen ondersteunen.
Voornamelijk is het Salmonella -geslacht zeer resistent tegen galzouten, zozeer dat ze in staat zijn om in de galblaas te leven van sommige dragerpatiënten die bacteriën constant door uitwerpselen verdrijven.
Differentiaal
Lactose is fermenteerbaar koolhydraat dat helpt bij het onderscheiden van lactose fermenterende stammen van niet -fermenteren. Deze eigenschap wordt bewezen door de aanwezigheid van de pH -indicator, die in dit medium het rood van Fenol is.
Lactose fermenterende stammen geven rode kolonies, terwijl niet -fermenteren kleurloos zijn. Deze functie is belangrijk, omdat Salmonella en Shigella geen lactose gisten.
Aan de andere kant bevat dit medium natriumthiosulfaat als een bron van sulfide en ijzercitraat als een ijzerbron. Beide verbindingen slagen erin om bacteriën te differentiëren die in staat zijn om waterstofsulfide te produceren. Deze reageren op een zwart neerslag van onoplosbaar en zichtbaar ijzersulfide.
Deze eigenschap heeft enkele stammen van het Salmonella -geslacht. Normaal gesproken zijn de kolonies kleurloos plat met een zwart punt in het midden van hetzelfde. De rest van de Salmonellas produceert geen h2S en ontwikkel zich als kleurloze koloniën.
Aan de andere kant zijn de kolonies van het Shigella -geslacht kleurloos plat zonder zwart te worden.
Kan u van dienst zijn: parthenogeneseVoorbereiding
Dit medium is heel eenvoudig te bereiden.
Weeg 63 gr van uitgedroogd commercieel medium en lost op in een liter gedestilleerd water. Verwarm de oplossing en schud. Het mengsel kan minuten minuten voor minuten bereiken.
Dit medium mag niet worden geautoreerd. Na de oplossing wordt het direct gebruikt op eenvoudige of dubbele steriele platen.
Door te stollen worden ze op een omgekeerde manier in bloedplaatjes besteld en tot gebruik worden bewaard in koelkast (2-8 ° C).
Het medium na voorbereide moet op pH 7,2 ± 0 zijn.2 en met oranje rood.
Het is belangrijk om de platen te laten temperen voordat de monsters zaaien. Het originele monster kan direct worden gezaaid, materiaal downloaden in een deel van de agar en dan vanaf daar om te worstelen door uitputting.
In het geval van het dragen van verrijkte bouillons, passeer een deel van de Selenito -bouillon en zaaien met Drigalski spatel.
37 ° C wordt 24 uur geïncubeerd in aerobiose.
Houd er rekening mee dat de hoeveelheid gram ondanks en de uiteindelijke pH van het medium kan variëren van een commercieel huis tot een ander. Het medium kwaad brengt altijd de aanwijzingen voor zijn voorbereiding.
Gebruik
Het wordt vaak gebruikt bij de analyse van coproultures en in de microbiologische studie van afvalwatermonsters, consumptiewateren en voedsel.
Vaak worden dubbele platen bereid, aan de ene kant wordt de Salmonella-Shigella-agar geplaatst en in de andere XLD-agar.
Beperkingen
-Sommige Shigella -stammen groeien niet in dit medium. Daarom wordt het niet aanbevolen voor het primaire isolement van dit genre.
-Niet elke transparante kolonie met zwart centrum is indicatief voor Salmonella; Biochemische tests moeten worden uitgevoerd om een correcte identificatie te maken, omdat de kolonies van sommige eiwitstammen niet te onderscheiden zijn van die van Salmonella.
Kan u van dienst zijn: populatie van dieren of biologisch-Het gedehydrateerde medium moet zorgen voor blootstelling aan het milieu, omdat het erg hygroscopisch is. Daarom moet het worden bewaard in een droge en goed gesloten omgeving. Open voor zeer korte periodes.
-Na verloop van tijd kunnen de galzouten van het medium neerslaan en een beeld vormen dat vergelijkbaar is met een verwarde in de agar, maar dit heeft geen invloed op de resultaten.
-Sommige Shigella -stammen kunnen lactose langzaam fermenteren.
QA
Om te bewijzen dat het medium goed werkt, is het raadzaam.
Hiervoor kunt u stammen van gebruiken EN. Coli, Enterobacter SP, Klebsiella Pneumoniae, Shigella Flexneri, Salmonella Typhimurium of Enterococcus faecalis.
De verwachte resultaten zijn:
Escherichia coli --Roze bolle kolonies.
Enterobacter en Klebsiella- Grote kolonies en rode of roze mucoides.
Shigella flexneri --platte of kleurloze platte kolonies.
Salmonella Typhimurium - Kleurloze kolonies met zwart centrum.
Enterococcus faecalis-- Totale remming.
Referenties
- Diffco Laboratories Francisco Soria Melguizo. Salmonella-Shigella Agar. Beschikbaar op: F-Soria.is
- BD -laboratorium. BD Salmonella-Shigella Agar. Beschikbaar op: BD.com