Maïsmeel. Fundering, voorbereiding en gebruik

Hij Maïsmeelagar Het is een solide kweekmedium, lage voedingskracht, nuttig voor de subcultuur Candida albicans. In het Engels staat het bekend als maïsmeel agar.

Het medium conventionele maïsmeel heeft een zeer eenvoudige samenstelling, bevat maïsmeel, agar en water. Vanwege het lage voedingsniveau is het ideaal om het te gebruiken bij het handhaven van schimmelstammen voor gemiddelde periodes, vooral zwarte schimmels.

NAAR. Grafische weergave van het Candida albicans -complex in maïsmeel agar. B. Clamidosporas van de Candida albicans complexe weergave naar de microscoop, gevormd in maïsmeel. Bron: a. Grahamcolm [CC BY-SA 3.0 (https: // creativeCommons.Org/licenties/by-sa/3.0)]/ B. Door: CDC/DR. William Kaplan, Courtesy: Public Health Image Library.

Complexe sporulatie Candida albicans Het wordt begunstigd in dit medium, als 1% van Tween 80 wordt toegevoegd tijdens de voorbereiding van de agar. Clamidospores -vorming is kenmerkend voor deze soort en praktisch de enige die de mens beïnvloedt.

Er zijn andere soorten die clamidospores vormen, maar het is onwaarschijnlijk dat ze de mens beïnvloeden, zoals Candida Australis, aanwezig in de uitwerpselen van pinguïns, of C. Clausenii, die een saprofyt is die zelden wordt gevonden. Ook uitzonderlijk de soort C. Stellatoid En C. tropicalis Ze zouden ze kunnen vormen.

Aan de andere kant bevordert de toevoeging van glucose aan de medium maïsmeel de vorming van pigmenten in stammen van Trichophytom rubrum.

Het is belangrijk om te benadrukken dat er schimmels zijn die geen hyphaifs vormen, noch pseudohifa's in maïsmeel Cryptococcus neoformans, Differentiëren van andere genres.

Maïsmeelagar kan zich voorbereiden in het laboratorium of commerciële media kunnen ook worden gebruikt.

[TOC]

Basis

Maïsmeel is substraat, agar is het stollingsmiddel en water is het oplosmiddel.

Maïsmeelagar kan worden aangevuld met Tween 80 (polyester 80 sorbitita monoolate of polysorbaat). Deze verbinding vermindert de oppervlaktespanning van de omgeving door zijn emulgierkracht.

Kan u van dienst zijn: fosfatidylinositol: structuur, training, functies

Het creëert ook een vijandige atmosfeer die overdreven celvermenigvuldiging remt en de groei van hyfen stimuleert, die ook de voorkeur geven aan de productie van clamidospores; De laatste beschouwde weerstandsstructuren. Deze structuur helpt bij de identificatie van de soort van Candida albicans.

Van zijn kant verhoogt glucose in dit medium de capaciteit van de pigmentvorming van sommige schimmels.

Opgemerkt moet worden dat het medium maïsmeel met glucose niet de demonstratie van clamidospores in C dientOmlejo candida albicans.

Voorbereiding

Zelfgemaakte maïsmeelapar

Weeg 47 gr van gele maïsmeel en lost op in 500 ml gedestilleerd water. Warmte tot 60 ºC, terwijl de voorbereiding wordt geagiteerd in een geschatte periode van 1 uur. Filter vervolgens door een stuk gaas en katoen, optioneel kan het opnieuw worden gefilterd via een Whatman -filterpapier nr. 2.

Voltooi het volume op 1000 ml met gedestilleerd water. Voeg 17 gr van agar-water toe, warmte om op te lossen. Autoclavar gedurende 15 minuten bij 121 ° C.

Serveer in petri -steriele platen. Bewaar in een koelkast.

De kleur van het voorbereide medium is witachtig met klonterige uiterlijk.

Als u maïsmeel met glucose wilt voorbereiden op de hierboven beschreven preparaat om 10 gr van glucose toe te voegen.

Commerciële maïsmeel agar

Weeg 17 gr van het gedehydrateerde medium en lost op in 1 liter gedestilleerd water. Het mengsel kan worden verwarmd, voorzichtig roeren om volledig op te lossen. Steriliseer in autoclaaf bij 121 ºC, 15 lb, gedurende 15 minuten.

Giet in petri -steriele platen. Laat stollen. Investeer en bewaar in koelkast tot gebruik. Humeur voordat u gebruikt.

De pH moet 6,0 ± 0,2 tot 25 ºC zijn.

Maïsmeelagar met tween 80

Om te voldoen aan de ISO 18416 -standaard, moet de maïsmale agar als volgt worden voorbereid:

Kan u van dienst zijn: acetyl co -enzym aan

Weeg 65 gr per liter en voeg 10 ml Tween 80 toe. Verwarm en kook een paar minuten totdat u oplost, zorg ervoor dat u niet te veel oververhit raakt. Steriliseer 15 minuten bij 121 ºC.

Maïsmeelagar met glucose

Om de chromogene kracht van de koloniën van te verbeteren Trichophyton rubrum en onderscheid ze van T. Mentagrofytes, 0,2% glucose aan de oorspronkelijke formule kan worden toegevoegd. Het hoeft geen Tween 80 te hebben, omdat glucose de vorming van clamidospores remt.

Gebruik

Vooral het gebruik van maïsmeelagar is bedoeld voor de studie van Candida -stammen, waardoor de identificatie ervan wordt geholpen door de karakteristieke observatie van chloidosporen in de albicans -soort. Dat wil zeggen, het gebruik van deze agar dient als een hulpmethode om deze gisten te identificeren.

In deze agar kan zowel saprofytische als pathogene soorten ontwikkelen, maar elke vorm van karakteristieke myceliale structuren. Soorten van het geslacht Torulopsis produceren bijvoorbeeld geen mycelium en reproduceren alleen door Blastoconidia.

Evenzo produceren trichhosporon en geotrichum soorten arthroonidia in maïsmeel en soms is het moeilijk om onderscheid te maken tussen de ene en de andere.

De arthroonidia van Genotrichum produceren een uitbreiding van de hyfen die lijkt op een hockeystick.

Ook pigmentproductie met behulp van glucose -gesupplementeerde maïsmeel agar is nuttig bij de identificatie van Trichophytom rubrum.

Gezaaid

In de agarmeelmeel de verdachte kolonies van openhartig. Het medium wordt 24 tot 48 uur gezaaid en geïncubeerd bij 22 ºC. Incubatietijd kan worden verlengd indien nodig.

Demonstratie van clamidospores

Voor dit doel moet de maïsmeelagar met Tween 80 worden geïnoculeerd met behulp van de Dalmau -techniek. Deze methode bestaat uit het nemen van een deel van de verdachte kolonie en het maken van drie parallelle sneden in het midden om het handvat op 45º te houden. De sneden moeten worden gescheiden op een afstand van 1 cm tussen de ene en de andere.

Kan u van dienst zijn: Flora en Fauna uit Afrika: Representatieve soorten

Vervolgens wordt een eerder gevlekt object over de gezaaide striae geplaatst, zodat de overdekte helft en de andere ontdekten.

Incubeer de platen geplant op 30 ° C gedurende 48-72 uur en onderzoek vervolgens de microscoop door de dekens.

Onderhoud van schimmelspanningen

Voor het onderhoud van spanningen worden de plaques geplant en overstromingen opgeslagen in de koelkast (4 tot 8 ºC). Op deze manier kunnen ze enkele weken meegaan en worden gebruikt voor lesgeven of onderzoeksdoeleinden.

QA

Voor steriliteitsregeling wordt een plaat zonder inoculeren bij kamertemperatuur geïncubeerd, er wordt verwacht dat er geen groei of kleurverandering is.

Voor kwaliteitscontrole kunt u bekende stammen zaaien zoals: Staphylococcus aureus, ATCC 6538, Escherichia coli ATCC 25922, Aspergillus niger ATCC 16404, Candida albicans ATCC 1023, Saccharomyces cerevisiae ATCC 9763.

De verwachte resultaten zijn gedeeltelijke remming voor S. aureus En EN. coli. Terwijl een bevredigende groei wordt verwacht in de rest van de spanningen.

Aspergillus niger Het groeit met zwarte kolonies en sporuleert in een geschatte tijd van 5 dagen incubatie.

Candida albicans Leeveaduriforme kolonies met productie van clamidospores.

Saccharomyces cerevisiae produceren grote gistcellen.

Beperkingen

Een geel neerslag wordt gevormd aan de onderkant van de plaat die niet moet worden verward met kolonies.

Referenties

1. Neogen Laboratories. Maïsmeel agar. Beschikbaar op: Foodsafety.Neogen.com.
2. Microkit -teeltmedia. Maïsmeel agar. Beschikbaar in: mediacultuur.com.
3. Linares M, Solís f. Geleide identificatie van gisten. Beschikbaar op: http: // www.gids.Ik zal nieuw leven inblazen.
4. Urcia F, Guevara M. Revisie. Peru Med.Exp. Public Health, 2002; 19 (4): 206-208. Beschikbaar bij: Scielo.com
5. Huis-huis G. Algemene mycologie. 1994.  2e ed. Centrale Universiteit van Venezuela, bibliotheekedities. Venezuela Caracas.
6. Forbes B, Sahm D, Weissfeld a. (2009). Bailey & Scott microbiologische diagnose. 12 ed. Pan -Amerikaanse redactionele s.NAAR. Argentinië.
7. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Microbiologische diagnose. 5e ed. Pan -Amerikaanse redactionele s.NAAR. Argentinië.
8. Castle E. Vergelijkende studie van sommige macro- en microscopische methoden voor de isolatie en herkenning van het geslacht Candida. Revisie. Colombiaanse farmaceutische chemische wetenschappen. 1970; 3 (1): 33-57. Beschikbaar in: Wetenschappen.een i.Edu.co