Moge Grünwald-Giemsa vlek

Chronische myeloïde leukemie monster, met kleuring van mei grünwald-giemsa. Bron: Paulo Henrique Orlandi Mourao, CC BY-SA 3.0, Wikimedia Commons

Wat is de kleuring van Grünwald-Giemsa?

De Moge Grünwald-Giemsa vlek, o Pappenheim, is een differentiële kleuringstechniek die de reagentia giemsa combineert en May Grünwald. Het wordt gebruikt voor de differentiatie van normale en abnormale bloedcellen in perifeer bloedstrijk en beenmerg, evenals voor het kleuring van histologische sneden en cytologische monsters.

Zowel reagentia -Giemsa als May Grünwald- zijn afgeleid van Romanowsky -kleuring, een techniek gebaseerd op de combinatie van zuur en basiskleuringen.

Giemsa verbeterde de techniek door het mengsel van eosine, methyleenblauw en zijn derivaten te stabiliseren, met glycerol. In plaats daarvan gebruikte Grünwald eosine en methyleenblauw, met behulp van de methanol als oplosmiddel. Deze strategische combinatie heeft uitstekende resultaten opgeleverd.

Terwijl in termen van celmorfologie -observatie vergelijkbaar is met de kleuringen van Giemsa en Wright, verbetert deze techniek het bovenstaande verfijning van de kleuring van de parasieten die malaria veroorzaken, het kwaad van Chagas, Leishmaniasis en trichomoniasisisisisisatie.

Bovendien is het zeer nuttig gebleken voor de cytologische studie van spermatische vloeistof. Het is niet alleen benadrukt door de morfologische kenmerken van sperma te tonen, maar maakt ook leukocyten, epitheelcellen en spermatogenese -cellen mogelijk om sterk te worden gedifferentieerd.

Basis

De techniek volgt de basis van de kleuring van Romanowsky, waarin zure kleurstoffen selectieve affiniteit hebben voor basiscelcomponenten en zure componenten die basiskleuringen aantrekken.

Met andere woorden, zowel celstructuren als kleurstoffen hebben positieve of negatieve elektrische belastingen, gelijke belastingen worden afgestoten en verschillende belastingen trekken aan.

Basisverf, zoals methyleenblauw, worden bijvoorbeeld positief geladen en aangetrokken door negatief geladen structuren. Daarom kleurt deze kleurstof de kernen die rijk zijn aan DNA en RNA die negatief geladen fosfatengroepen hebben.

De korrels van de basofiele gesegmenteerde en de cytoplasmata van de mononucleaire witte bloedcellen die ARN bevatten, zijn ook gekleurd.

Het kan je van dienst zijn: Jalisco's Flora en Fauna: Representative Soorten

Ook heeft de zure kleurstof een negatieve belasting, dus bindt deze aan positief geladen structuren zoals erytrocyten en korrels van de gesegmenteerde eosinofielen. Wat betreft de korrels van de gesegmenteerde neutrofielen, beide kleurstoffen zijn ingesteld.

Verscheidenheid aan kleurstoffen

In deze techniek bestaat een combinatie van reacties tussen orthochromatische en metacromatische kleuren. Ortochromatisch (eosine en methyleenblauw) worden gefixeerd op de celstructuur waaraan ze gerelateerd zijn en bieden een stabiele kleur die niet varieert.

Aan de andere kant, metacromatisch (die afgeleid van methyleenblauw, azuurblauw en azuur.

Ten slotte heeft de stap die de mei Grünwald -oplossing neemt, de aanwezigheid van water nodig, want zonder deze zal de kleurstof de structuren binnendringen, maar deze zal niet worden opgelost. Om te gebeuren, moet de kleurstof polair of ioniseren worden en zo kunnen neerslaan en naar de bijbehorende structuren kunnen kijken.

Techniek

Materialen

• Schuifbladen.
• Kleurbruggen.
• Moge Grünwald -oplossing.
• Giemsa -vlekken.
• Gedistilleerd water.

Geconcentreerd mei grünwald kleurstof

0,25 gr van methyleen eosine-blauw (kleurstof volgens mei Grünwald) en oplossen in 100 ml methanol moet worden gewogen. Dan wordt de voorbereiding gedurende 1 uur gemengd en laat het 24 uur staan. Na verloop van tijd wordt het gefilterd.

Om de techniek toe te passen, wordt de mei Grünwald -kleurstof als volgt verdund: voor 200 ml verdunde kleurstof wordt 30 ml van de geconcentreerde oplossing gemeten, 20 ml bufferoplossing en 150 ml gedestilleerd water aangepast aan pH 7.2-7.3. Vervolgens wordt het gemengd en gefilterd.

Geconcentreerde Giemsa -kleurplaten

0,5 gr van azur-eosine-piek van methyleen (kleurstof volgens Giemsa), lost op in 50 ml methanol en voeg 50 ml glycerine toe.

Om de techniek uit te voeren, wordt 1:10 verdund met bufferoplossing en laat het 10 minuten staan. Het kan indien nodig worden gefilterd.

Kan u van dienst zijn: Mesénquima

Bereiding van de bufferoplossing bij pH 7,2

Ze moeten worden gewogen:

• 40 mg di-hydrogen kaliumfosfaat (KH2PO4).
• 151 mg waterstof di-syfotisch fosfaat 12-hydraat (Na2HPO4).

Beide verbindingen worden opgelost in 100 ml water.

Sanguine of bot Medol Srols Tincion Procedure

Er zijn twee modaliteiten: een klassieker en snel.

Klassieke modaliteit

• Bedek de geur gedurende 2 of 3 minuten met de mei Grünwald -oplossing verdund.
• Was met gebufferd gedestilleerd water om de vorige oplossing te verwijderen.
• Bedek met dezelfde gebufferde wasoplossing en vertrek 1 minuut. Het idee is dat de voorste kleurstof aan de structuren wordt bevestigd en dat de cellen tegelijkertijd gehydrateerd zijn.
• Voeg 12 verdunde Giemsa -tinctuurdruppels toe op gebufferd water en blaas om te mengen en te homogeniseren. Laat 15 of 20 minuten staan.
• Was het uitstrijkje met gebufferd gedestilleerd water en plaats het om in de lucht te drogen.
• Focus en observeer in een optische microscoop de verven bloedcellen met behulp van het 40x -doelwit. Indien nodig kan 100x worden gebruikt.

Snelle modus

• Bedek het uitstrijkje met de mei Grünwald -kleurstof gedurende 1 minuut verdund.
• Was met gebufferd gedestilleerd water.
• Bedek met gebufferd water en laat 1 minuut staan.
• Plaats de verdunde Giemsa -kleurstof en vertrek 5 minuten.
• Was met gebufferd gedestilleerd water en laat de lucht drogen.

De hier beschreven technieken zijn een leidende gids, maar er moet rekening mee worden gehouden dat de procedures en kleuringstijden variëren volgens het commerciële huis dat de reagentia verkoopt. Het is raadzaam om de stappen te volgen die strikt worden aangegeven door elk commercieel huis.

Uitgebreide sperma -vloeistofkleurtechniek

• Bedek de uitgebreide met een fijne laag van de mei Grünwald -oplossing gedurende 4 minuten.
• Verwijder de kleurstof en wassen met gedestilleerd water.
• Plaats een verdunde Giessa -laag (1:10) in gedestilleerd water gedurende 15 minuten.
• Verwijder de kleurstof en wassen met gedestilleerd water.
• Laat drogen en observeren in de microscoop.

Kan u van dienst zijn: Butyric Fermentation

Belangrijke specificaties

De techniek stelt dat de reagentia en wasoplossingen een pH hebben aangepast aan 7.2-7.3, zodat de affiniteiten van de kleurstoffen door celstructuren niet worden vervormd en de verwachte uiteindelijke kleur niet varieert.

Toepassingen

• Deze techniek wordt gebruikt door klinische laboratoria om perifeer bloedwrijven en beenmerg, weefselsneden en cytologieën te verven.
• In het hematologische veld is deze techniek van vitaal belang in de studie van afwijkingen van de cellen in termen van vorm, grootte en aantal. Het is een zeer waardevol hulpmiddel voor de diagnose van bepaalde ziekten, zoals leukemie en anemieën.
• Het presenteert een uitstekend hulpprogramma wanneer het op zoek is naar parasieten in het hematologische veld (Plasmodium SP En Cruzi Tripaosoma) of histologisch (Leishmanias sp)).
• Wat betreft vaginale cytologie, deze techniek is vooral voordelig voor de observatie van Trichomonas vaginalis. Dit is een belangrijke bevinding, omdat de aanwezigheid ervan carcinoomschilderijen simuleert In situ dat verdwijnt dan wanneer de parasiet wordt geëlimineerd.
• Het is een ideaal hulpmiddel geweest voor de studie van spermamonsters, omdat het waardevolle informatie biedt over de kwaliteit van sperma. De gegevens die het aanbiedt, moeten voornamelijk te maken hebben met aantal en morfologie, evenals met gelijktijdige cellen die aanwezig kunnen zijn en die van vitaal belang zijn, zoals kiemcellen, leukocyten en epitheelcellen. Met deze analyse is het mogelijk om afwijkingen te beschrijven die zijn waargenomen in sperma op het hoofd, de nek, het middenstuk en het hoofdstuk. Bovendien kunnen ze ook helpen bij het tonen van gevallen van hosospermie (aanwezigheid van rode bloedcellen) en leukospermie of piospermie (toename van het aantal leukocyten in sperma).

Referenties

1. Merck Kgaa Laboratory. Moge Grünwald Eosina Blue Microscopy Methyleen.
2. May-Grünwald-Giemsa-kleuring. Hersteld van ES.Wikipedia.borg.
3. Glaschemicaliën Panreac Laboratory. Reagentia voor histologische technieken, hematologie en microbiologie. Hersteld van Glasschemicalals.com.