Xantoproteic Reaction Foundation, procedure, gebruik

De Xantoproteic reactie Het is een chemische procedure die wordt gebruikt om de aanwezigheid of afwezigheid van aromatische aminozuren te bepalen, zoals tyrosine en tryptofaan, die vrije of oplosbare eiwitten, peptiden of polypeptiden kunnen zijn.

Het is ook gebruikt om giftige stoffen op het bloedniveau te detecteren dat een bonencenische groep in zijn structuur bevat. Deze test staat ook bekend als bechere xantoproteic reactie.

Positieve Xantoproteic Reaction Bron: genomen uit video: https: // youtu.BE/GZGMBW5W4WO

De xantoproteische reactie maakt gebruik van geconcentreerd salpeterzuur, warmte en een neutraliserende alkali. Als bij het neutraliseren van de reactie de gele tot oranje oplossing -oplossing als positief wordt beschouwd. De waargenomen kleuring is te wijten aan de vorming van stikstofverbindingen afgeleid van de nitrificatie van de benzenische groepen.

Als u de hoeveelheid totale eiwitten moet kwantificeren, is het noodzakelijk om andere eiwitbepalingsmethoden te gebruiken, zoals Biuret.

De Xantoproteic -reactie wordt voornamelijk gebruikt wanneer stoffen worden geanalyseerd waarop de chemische samenstelling ervan niet bekend is. Over het algemeen maakt deze reactie deel uit van een reeks tests die de chemische samenstelling van een specifieke stof of extract zullen helpen bepalen. Daarom wordt het veel gebruikt door onderzoekers.

Aan de andere kant wordt de Xantoproteic -reactie van Becher gebruikt om fenolische en indolische stoffen in het bloed te detecteren, waardoor het uiterlijk van nefropathie kan worden voorspeld, voordat andere meer parameters worden verhoogd.

[TOC]

Basis

De reactie detecteert in feite de aanwezigheid van de benzenische groep, beide in aminozuren, zoals in eiwitten en peptiden. Salpeterzuur werkt op het aminozuur bencenische ring die het bezit en vormt fenolische nitrocomposities.

De reactie moet warmte moeten worden uitgevoerd, meestal wordt een neerslag gevormd dat het medium vasthoudt, waardoor het melkachtig is. Het neerslag kan wit of geel zijn. Ten slotte vereist het een alkalisatiestap die de kleur accentueert. Hiervoor wordt een basis gebruikt als 40% of ammoniaknatriumhydroxide.

De reactie zal worden geïnterpreteerd als positief als een sterke gele kleuring wordt waargenomen tijdens het donkere verwarming of oranje proces door de reactie te alkaliseren. De gedetecteerde aminozuren zijn voornamelijk tyrosine en tryptofaan.

Xantoproteic reactie. Bron: http: // esteroisomeras.Blogspot.com/2013/06/karakterisering-van-eiwitten.HTML

In het geval van fenylalanine, hoewel het een aromatische aminozuren is, is de benzeenkern van dit aminozuur moeilijk te nitatiseren in een eenvoudige reactie, daarom zal het uitstralen of een negatief of zwak positieve reactie.

Kan u van dienst zijn: polariteit (chemie): wat is, definitie, voorbeelden

Over het algemeen kan de Xantoproteic-test worden aangevuld met de Hopkins-Cole-test, die dient om specifiek triptofaan te identificeren. Als de Xantoproteic-test positief is en die van Hopkins-Cole negatief is, wordt de aanwezigheid van tryptofaan weggegooid in die oplossing, wat leidt tot de aanwezigheid voornamelijk van tyrosine. Evenzo kan het ook worden aangevuld met de reactie van Millon voor tyrosinedetectie, onder andere.

Deze reactie kan ook worden gebruikt op bloedmonsters, plasma of ongewijzigd serum voor de diagnose van uremie of nierinsufficiëntie. In dit geval is wat wordt gevraagd de detectie van giftige stoffen (fenolisch en indolisch) geproduceerd uit darmrot.

Deze stoffen bezitten de benzenische groep en geven daarom een ​​positieve xantoproteische reactie, hoewel de reactionaire stoffen noch een aminozuur zijn, noch een eiwit.

Procedure

- Xantoproteische reactie voor aminozuurdetectie met aromatische groepen

Plaats 1 ml van het probleemmonster in een schone en droge testbuis.

-Voeg 0,5 ml geconcentreerd salpeterzuur toe.

-Incubeer het mengsel 2 minuten in een badkamer van 70 ° C. Bereid eerder het Maria -bad voor bij de bovengenoemde temperatuur.

-Wanneer u de buis uit het Maria -bad neemt, is het mogelijk om op te merken dat de oplossing melkachtig is geworden en wat gelige witte kleur heeft genomen.

-De oplossing wordt gekoeld door koud water te laten vallen aan de basis van de buis.

-De voorbereiding wordt beweerd door langzaam (druppel bij druppel) een 40% natriumhydroxide -oplossing totdat er een kleurschok is.

-Als de test positief is, wordt een donkere oranje ring gevormd in de vloeistofinterface.

-Als de reactie negatief is, is er geen kleurvorming.

- Xantoproteische reactie om fenolische en indolische stoffen in het bloed te detecteren

-Levert 5 cc trichloorazijnzuur bij 20% meer dan 5 cc veneus bloed, plasma of serum, de laatste is het meest aangegeven. Meng goed en filter.

Kan u van dienst zijn: salpeterzuur (hnO3)

-2 cc van de filtering wordt genomen en gemengd met 0,5 cc salpeterzuur. Dan wordt het verwarmd om te koken, hiervoor wordt de buis 30 seconden direct op de vlam van de lichter geplaatst. Koelt met water en voeg 1,5 natriumchloride toe bij 33%.

Het wordt als volgt geïnterpreteerd:

-Negatief resultaat: geelachtige kleur.

-Positief resultaat (+) citroengeel.

-(++) goud geel.

-(+++) donker geel tot bruin

Het kan ook worden geïnterpreteerd met behulp van een referentiële colorimetrische schaal van auenrieth, gevormd door verschillende concentraties kaliumbicromato. Dit wordt bereid in verdunningen van 10 op 10 uit een moederoplossing van 0,03874%. Elke buis vertegenwoordigt een percentage.

Interpretatieschalen

Er zijn twee interpretatieschalen die oud en modern worden genoemd. De normale waarden zijn:

Oude tabel: tussen 75 en 85%

Moderne tabel: tussen 15 en 25%

Als de kleur van de probleembuis zich in het midden van twee patronenbuizen bevindt, wordt gemiddeld tussen beide maatregelen gemaakt.

De oplossing voor kaliumdichromaatpatroon wordt als volgt bereid: 7 wordt gemeten.9 ml kaliumdichromaat bij 10 n en is gelijkmatig tot 100 ml in een Aggorado -bal. Voor verdunningen wordt het gevolgd zoals het wordt getoond in de colorimetrische tabel van autenhieth.

Colorimetrische tabel van autenetrie. Bron: Vásquez a. Xantoproteic reactie. Spaans klinisch tijdschrift. 1949; 35 (5): 326-327. Beschikbaar op: Elsevier

Gebruik

Het gebruik van de Xantoproteic -reactie maakt deel uit van een reeks biochemische tests die helpen om de chemische samenstelling van een onbekende stof te kennen. Deze test draagt ​​bij aan de chemische analyse de detectie van eiwitten die benzenische groepen in hun structuur bevatten.

Deze reactie wordt op grote schaal gebruikt door onderzoekers in verschillende middelenstudies.

In die zin gebruikten Vásquez-Jorge en medewerkers deze en andere reacties om het eiwitgehalte van vloeistoffen te onderzoeken die uit mangrove-ostion zijn geëxtraheerd (Crassostrea Rhizophorae).

Evenzo gebruikten Rojas en medewerkers (2009), een reeks tests, waaronder de Xantoproteic -reactie, om glycomacropéptiden te analyseren in neerslag van lactosueros de ricotta.

Aan de andere kant werd de Xantoproteic -reactie van Becher gemodificeerd door Volhard om voor andere doeleinden te worden gebruikt. In dit geval zijn voor de detectie van fenolische en indolische stoffen die veel eerder (weken of maanden) kunnen worden verhoogd dat de niveaus van ureum en resterende stikstof in bloed zijn verhoogd.

Het kan u van dienst zijn: Cerio: Structuur, eigenschappen, verkrijgen, gebruik

Dit giftige afval wordt gevormd uit de darmrot van voedsel.

Deze stoffen hopen zich in het bloed op wanneer ze niet goed worden geëlimineerd, daarom kan een positieve xantoproteische test de snelle oprichting van nierfalen zelf of een staat van uremie voorspellen.

Volgens kleurintensiteit kunt u bepalen hoe geavanceerd het is. In dit geval is de test kwantitatief.

Bij gezonde mensen geeft deze test een lichte gele kleur, overeenkomend met de normale niveaus van tryptofaan en tyrosine die in het bloed kunnen zijn.

Terwijl bij nierpatiënten de xantoproteische reactie sterk positief geeft vanwege de aanwezigheid van de volgende stoffen: fenol, indol, paracresol, aromatische oxyzuren, onder andere.

Voorzorgsmaatregelen

Deze test moet worden uitgevoerd door getrainde professionals. Alle normen voor bioveiligheid moeten worden overwogen, omdat de gebruikte reagentia zuren en corrosieve basen zijn.

Als per ongeluk een paar druppels salpeterzuur op de huid of nagels vallen, worden ze geel, omdat beide structuren eiwitten bevatten. Bovendien veroorzaakt het op de huid en slijmvlies ernstige brandwonden.

Als er een contact met de huid optreedt, moet het te volgen protocol zijn om het gebied onmiddellijk met zeep en water te wassen gedurende ongeveer 20 minuten.

Als je de ogen bespat, moet je met veel zoet water wassen, proberen je ogen open te houden.

Referenties

1. "Xantoproteica -reactie" Wikipedia, gratis encyclopedie. 2 september 2019, 17:49 UTC. 21 oktober 2019, 20:31 Wikipedia.org/
2. Vásquez-Jorge en, Guerra-Molina L, Quintana-Tamayo J, Ramírez-Arzuaga J, Fernando-Ballesteros R, Vásquez-Jorge en. Fysicochemische karakterisering en eiwitgehalte van vloeistofextracten van mangrove -ostion (Crassostrea Rhizophorae)). Cubaanse chemie, 2014; 26 (1): 66-74. Beschikbaar in Redalyc.
3. Rojas E, Valbuena E, Torres G, García A, Piñero M, Galindo L. Isolatie en prestaties van de GMP door lactosuero -neerslag met tricloorazijnzuur. Wetenschapper. (Maracaibo) 2009; 19 (3): 295-302. Beschikbaar op: VE.Scielo.
4. Vásquez a. Xantoproteic reactie. Spaans klinisch tijdschrift. 1949; 35 (5): 326-327. Beschikbaar op: Elsevier
5. Gálvez I, Gárate of. Becher- en Andrewes -reacties bij urinaire chirurgie. Spaanse urologiedienst in het ziekenhuis. Argentijnmagazine van Urology 395-404