Tripticaseína soja bouillon wat is, fundering, voorbereiding, gebruik

Hij Tripticaseína Soja -bouillon Het is een vloeibare kweekmedium, zeer voedzaam en niet selectief. Vanwege de grote veelzijdigheid is het een van de meest gebruikte vloeibare cultuurmedia in het microbiologielaboratorium.

Het is ook bekend onder de naam Triptic Soja Soy Tryptisch ben ik Bouillon of cst). Het gebruik ervan is zeer gevarieerd vanwege hun compositie. Het bestaat uit Tripteine, pepton van sojabonen, natriumchloride, dipotassium en glucosefosfaat.

Soja Soy Tripticaseína gezaaid met een stam van Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 waar de pigmentproductie wordt waargenomen. Bron: Foto gemaakt door de MSC -auteur. Marielsa Gil.

Het is in staat om klinisch belangrijke pathogene bacteriën te reproduceren, inclusief die welke eisen vanuit voedingsoogpunt en anaërobe bacteriën. Sommige opportunistische en verontreinigende schimmels kunnen zich ook in dit medium ontwikkelen.

Vanwege het hoge voedingskracht heeft het een hoge gevoeligheid om microbiële besmetting te detecteren, om deze reden werd het gekozen door de USDA -dieren- en plantgezondheidsinspectie -service voor de microbiologische analyse van vaccins.

Evenzo voldoet de Tripticaseína Soja -bouillon aan de eisen van de verschillende farmacopoeans (Europese EP, Japanse JP en Noord -Amerikaanse USP) voor de microbiologische studie van producten op industrieel niveau, zoals cosmetisch en voedsel.

Aan de andere kant is het vermeldenswaard dat ondanks het grote gebruik dit medium relatief economisch is, dus het is betaalbaar voor de meeste microbiologielaboratoria. Bovendien is het heel gemakkelijk om te bereiden.

Basis

Tripteine, peptone en glucose bieden essentiële voedings eigenschappen om het een ideaal medium te maken voor snelle microbiële ontwikkeling.

Kan u van dienst zijn: Linneaanse taxonomie van levende wezens

Ongeveer 6 tot 8 uur incubatie U kunt de groei in de meeste micro -organismen al waarderen. Er zijn echter langzame groeistammen die kunnen duren om te groeien.

Natriumchloride en dipotasisch fosfaat fungeren respectievelijk als een osmotisch en pH -regulatorevenwicht. De aanwezigheid van groei wordt bewezen door het verschijnen van troebelheid in het midden; Als er geen groei is, blijft het medium doorzichtig.

Vanwege zijn lichte kleur is het mogelijk om de productie van pigmenten te observeren, zoals die getoond in de afbeelding die zich aan het begin van het artikel bevindt, dat overeenkomt met het pigment geproduceerd door Pseudomonas aeruginosa. 

Voorbereiding

-Tripticaseína Soja -bouillon

Om de drieluik soja -bouillon voor te bereiden, moet 30 gr van gedehydrateerd commercieel medium worden afgewogen in een digitale balans. Lost vervolgens op in een liter gedestilleerd water in een fixola.

Het mengsel blijft 5 minuten in rust en neemt vervolgens een warmtebron om de medium ontbinding te helpen. Het moet vaak worden geagiteerd tijdens het koken per 1 minuut.

Eenmaal opgelost is het verdeeld in buizen van de juiste grootte indien nodig. U kunt buizen gebruiken met katoenen dop of baquelita -tapas. Vervolgens worden de buizen gedurende 15 minuten gesteriliseerd in de autoclaaf bij 121 ° C.

De middelgrote pH moet 7,3 ± 0,2 zijn

Er moet rekening mee worden gehouden dat de kleur van de gedehydrateerde cultuur beige helder is en op een droge plaats tussen 10 en 35 ° C moet worden bewaard,. Terwijl de voorbereide bouillon licht amber is en moet worden bewaard in de koelkast (2 tot 8 ° C).

-Tripticaseína Soja -bouillonvarianten

Gemodificeerde Tripticasein -sojabouillon kan worden voorbereid door galzouten en novobiocine toe te voegen om dit te selecteren voor het isoleren van EN. coli. Een andere optie voor hetzelfde doel is om de soja -sojabouillon voor te bereiden, aangevuld met vancomycine, cephixime en telurito (2,5 µg/ml).

Kan u van dienst zijn: 25 voorbeelden van aseksuele reproductie

Aan de andere kant kan meer glucose (0,25%) worden toegevoegd aan de Tripticaseína Soja -bouillon wanneer het doel is om de vorming van biofilms te stimuleren.

Gebruik

Het is voedzaam genoeg om de groei van veeleisende of irritante bacteriën te laten Streptococcus pneumoniae, Streptococcus SP en Brucella SP, Het is niet nodig om met bloed of serum aan te vullen.

Evenzo kunnen sommige schimmels zich ontwikkelen in deze bouillon, zoals Candida albicans complex, Aspergillus SP En Histoplasma capsulatum.

Bovendien is dit medium onder anaërobe omstandigheden ideaal voor het herstellen van bacteriën die tot het geslacht Clostridium behoren, evenals anaërobe bacteriën die niet van klinisch belang zijn gesporuleerd.

Als 6,5% natriumchloride wordt toegevoegd, kan dit worden gebruikt voor de groei van Enterococcus en andere Streptococcus van groep D.

Op onderzoeksniveau is het zeer nuttig geweest in verschillende protocollen, vooral in de studie van biofilms of biofilms die bacteriën vormen. Het wordt ook gebruikt om de 0,5% Mac Farland -bacteriële suspensie te bereiden die nodig is om het antibiogram uit te voeren volgens de Kirby- en Bauer -methode.

In dit geval worden 3 tot 5 kolonies van soortgelijke verschijning genomen en geëmulgeerd in 4-5 ml soja soa tripticaseïne. Vervolgens wordt het 2 tot 6 uur geïncubeerd bij 35-37 ° C en past vervolgens in de gewenste concentratie met behulp van steriele zoutoplossing. Tripticasein Soja Wakes mag niet worden gebruikt van 18 tot 24 uur incubatie.

Gezaaid

Het monster kan direct worden gezaaid of pure kolonies die van selectieve middelen worden genomen, kunnen worden onderworpen aan. Het inoculum moet klein zijn om het medium niet te vertroebelen vóór incubatie.

Normaal wordt het 24 uur bij 37 ° C in aerobiose geïncubeerd, maar deze aandoeningen kunnen variëren afhankelijk van het gevraagde micro -organisme. Het kan ook worden geïncubeerd in anaerobiose -aandoeningen bij 37 ° C gedurende meerdere dagen indien nodig. Bij het veeleisen van micro -organismen of langzame groei kan het bijvoorbeeld maximaal 7 dagen worden geïncubeerd.

Kan u van dienst zijn: dextrose Aardappelagar: fundering, voorbereiding en gebruik

In de microbiologische analyse van farmaceutische stoffen - zoals vaccins - zijn protocollen strenger. In deze gevallen wordt de bouillon zonder groei niet uitgesloten totdat het 14 dagen van continue incubatie voldoet.

QA

Van elk voorbereide perceel moeten 1 of 2 buizen worden geïncubeerd om de steriliteit aan te tonen. Moet blijven zonder verandering.

U kunt ook bekende spanningen zaaien om uw gedrag te evalueren. Onder de soorten die kunnen worden gebruikt, zijn:

Aspergillus brasiliensis ATCC 1604, Candida albicans ATCC 10231, Bacillus subtilis ATCC 6633, Staphylococcus aureus ATCC 6538 of 25923, Escherichia coli ATCC 8739,  Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Salmonella Typhimurium ATCC 14028.

In alle gevallen moet de groei bevredigend zijn onder de atmosfeeromstandigheden en voldoende temperatuur voor elke micro -organisme.

Beperkingen

-Glucosefermentatie veroorzaakt de afdaling van de middelgrote pH door zure productie. Dit kan ongunstig zijn voor het overleven van sommige zuurgraadgevoelige micro -organismen.

-Het wordt niet aanbevolen voor het handhaven van spanningen, omdat bacteriën na een paar dagen na een paar dagen uitlaatvoedingsstoffen met de daaruit voortvloeiende accumulatie van giftige stoffen die de onherbergzame omgeving maken.

-U moet werken om voor alle steriliteitsprotocollen te zorgen, omdat de bouillons gemakkelijk besmettelijk zijn.

-Na het bereiden van de Tripticasein Soja -bouillons moet het niet worden geprobeerd om bouillon over te dragen voor een andere steriele buis, omdat dit type manoeuvres zeer kwetsbaar is voor besmetting.

Referenties

1. Britania laboratorium. Tripteine ​​soja -bouillon. Beschikbaar op: Britanialab.com
2. MCD -laboratorium. Tripticaseína Soja -bouillon. Beschikbaar bij: elektronische systemen.com
3. Neogen Laboratory.  Triptych soja bouillon. Beschikbaar op: Foodsafety.Neogen.com