Selenito bouillon wat is, fundering, voorbereiding, gebruik

Hij Selenito -bouillon Het is een selectieve vloeibare kweekmedium. Het werd ontworpen door Leifson voor de verrijking van monsters waarbij de aanwezigheid van enteropathogene bacteriën van het geslacht Salmonella wordt vermoed.

Deze media voldoet aan de eisen van de American Public Health Association (APHA) en wordt daarom geaccepteerd voor het onderzoek naar Salmonella's aanwezigheid in ontlastingsmonsters, urine, vloeistof of vast voedsel, water, onder andere.

Selenito -bouillon. Bron: Foto gemaakt door de MSC -auteur. Marielsa Gil

De chemische samenstelling dat het de herstel van deze micro -organismen heeft en op zijn beurt de groei van anderen remt. Het is voornamelijk giftig voor de meeste bacteriën die tot de familie Enterobacteriae behoren. Het maakt echter ook het herstel van Shigella -stammen mogelijk en belt de groei van Pseudomonas en Proteus echter niet.

Het is samengesteld uit watervrij natriumwaterstofselen, watervrij natriumfosfaat, peptonas en lactose. Er is ook een variant waaraan Cistina wordt toegevoegd, vandaar haar naam Selenito-Cistina-bouillon.

Momenteel heeft het gebruik van Selenito-Cistine-bouillon de voorkeur, omdat een hoger percentage van Salmonella-herstel gelijkwaardig is aan dat waargenomen met andere selectieve middelen met hetzelfde doel wordt verkregen, zoals de natriumtetrationaatbouillon.

Basis

De peptones in de bouillon dienen als voedingsstoffen voor de goede ontwikkeling van micro -organismen. Salmonella -stammen gebruiken peptonen als een bron van stikstof, vitamines en aminozuren.

Lactose is fermenteerbaar koolhydraat, terwijl natriumseleniet de remmer is die de groei van gram -positieve bacteriën vertraagt ​​en de meeste bacteriën aanwezig in de darmflora, vooral de Enterobacteriae -familie. Natriumfosfaat is de schokdemper die de medium pH stabiliseert.

Kan u van dienst zijn: chemiosteaat: kenmerken, geschiedenis en gebruik

In het geval van de Selenito-bouillonvariant die L-Cistine bevat, is deze extra verbinding een reductiemiddel dat de toxiciteit van het seleniet minimaliseert, waardoor het herstel van Salmonella wordt verhoogd.

Voorbereiding

-Selenito -bouillon

Als u de componenten van het mengsel heeft, kunt u wegen:

4 gr van watervrij natriumwaterstof.

10 gr van watervrij natriumfosfaat.

5 gr van peptones.

4 gr van lactose.

Los de verbindingen op in 1 liter steriel gedestilleerd water. Het kan enigszins worden verwarmd om in zijn geheel op te lossen.

Sommige laboratoria stellen het medium gedurende 10 minuten bloot aan vloeiende stoom om het te steriliseren, omdat autoclaaf niet mag worden gebruikt. Als het medium wordt gesteriliseerd, kan het worden opgeslagen in de koelkast tot het gebruik.

Het kan ook worden voorbereid zonder te steriliseren en 10 tot 15 ml te serveren tot steriele testbuizen.

In dit geval moet u laten staan ​​en onmiddellijk gebruiken. Omdat het medium niet steriel is, kan het niet worden opgeslagen in een koelkast voor later gebruik.

-Commerciële media -voorbereiding

Als het commerciële medium beschikbaar is, 23 gr van het gedehydrateerde medium en opgelost in een liter steriel gedestilleerd water. Kort verwarm om op te lossen. Steriliseer niet in autoclaaf. Serveer aseptisch 10 of 15 ml in steriele testbuizen.

De uiteindelijke pH van het medium moet 7,0 ± 0,2 zijn.

Opgemerkt moet worden dat de kleur van het gedehydrateerde medium beige is en de voorbereiding duidelijk en doorzichtig amber is.

Selenito-Cistine Broth-variant

Het bevat dezelfde selenietbouillonverbindingen, maar 10 mg cystina is toegevoegd. De rest van de procedure is exact hetzelfde als hierboven beschreven.

Kan u van dienst zijn: parafiletische groep

Toepassingen

Dit medium is speciaal om te worden gebruikt in epidemiologische studies, in gevallen waarin de ziekte zich niet in haar acute stadium bevindt, asymptomatische patiënten of gezonde dragers.

Het isolement van de geslacht Salmonella is meestal moeilijk, omdat ze normaal gesproken de monsters op een korte manier verontreinigen. In een gek zijn.

Aan de andere kant worden de grondstof waarmee verwerkte voedingsmiddelen vaak worden bereid worden blootgesteld aan warmte-, uitdrogingsprocessen, het gebruik van desinfectiemiddelen, straling en conserveermiddelen, onder andere.

Daarom worden de Salmonellas die aanwezig zijn in de grondstoffen mishandeld door het indienen van het product aan de bovengenoemde industriële processen. Evenzo kunnen in het geval van klinische monsters zoals uitwerpselen stammen zwak zijn als ze afkomstig zijn van patiënten die met antibiotica zijn behandeld.

Daarom moet elk monster worden vermoed van de aanwezigheid van Salmonella voorverrijkend in lactosado -bouillon en vervolgens verrijkt in Selenito -bouillon om zijn herstel in de selectieve media te optimaliseren, zoals SS Agar, Xilosa Agar, de -xicolade lysine (XLD) , Hoktoen Enteric (HE) en Green Apar -Brillante, onder anderen.

Gezaaid

Neem voor ontlastingsmonsters 1 gram monster en hang in een buis met 10 tot 15 ml Selenito -bouillon. Als de uitwerpselen vloeibaar zijn, neem dan 1 ml en hangt in de bouillon. Download voor rectale wattenstaafjes het wattenstaafselmateriaal in de bouillon.

Neem in vaste voedselmonsters 1 gram en schors in de Selenito -bouillon.

Meng in vloeibaar voedsel in gelijke delen met dubbele concentratie selenietbouillon.

Kan u van dienst zijn: hallucigenia

Voor urinemonsters moet u centrifugeren, het supernatant weggooien, al het sediment nemen en het in de Selenito -bouillon schorten.

De bouillons bij 37 ° C worden 24 uur incubatie geïncubeerd. Bacteriegroei wordt bewezen door troebelheid. Een extra buis per monster kan ook worden opgenomen om 42 ° C te incuberen. Vervolgens zaaien selectieve solide media van de Selenito -bouillon.

QA

Voor steriliteitscontrole wordt 37 ° C 24 uur een selenito -bouillon van elke partij geïncubeerd zonder te inoculeren. Er wordt verwacht dat er geen troebelheid is, geen gemiddelde kleurverandering.

Om de juiste werking van het medium te regelen, kunnen bekende stammen worden gebruikt, zoals:

Salmonella enteritidis ATCC 13076, Salmonella Typhimurium ATCC 14028,  Salmonella choleraesuis ATCC 12011, Escherichia coli ATCC 25922 en Proteus Mirabilis ATCC 43071.

De verwachte resultaten zijn:

• Voor de eerste drie bacteriestammen moet de groei bevredigend zijn.
• Voor Escherichia coli Gedeeltelijke remming.
• Voor proteus matige groei.

Beperkingen

De half -Selenito -bouillon is giftig voor de menselijke huid, daarom moet direct contact worden vermeden.

Referenties

1. Britania Laboratories. Selenito -bouillon. Beschikbaar op: Britanialab.com
2. Neogen Laboratories. Selenito -bouillon. Beschikbaar op: Foodsafety.Neogen.com