Vogel-Johnson Agar What Is, Foundation, Preparation, gebruikt

Hij Vogel-Johnson Agar Het is een solide, selectieve en differentiële cultuurmiddelen, speciaal geformuleerd voor isolatie van Staphylococcus aureus. Dit medium is gemaakt door Vogel en Johnson in 1960 van de aanpassing van de Telurito Glycina Agar geformuleerd in 1955 door Zebovitz, Evans en Niven.

De modificatie bestond uit het verhogen van de concentratie van manitol aanwezig in de omgeving en bij de opname van een pH -indicator. De huidige formule bestaat uit Tripteína, gistextract, mannitol, dipotassiumfosfaat, lithiumchloride, glycine, fenolrood, agar, 1% kaliumtelurietoplossing.

Opgemerkt moet worden dat er andere media zijn die, zoals de Vogel-Johnson Agar selectief zijn voor isolatie van S. aureus, zoals Salty Mannitol Agar en Baird Parker Agar. In die zin zou kunnen worden gezegd dat de basis van de Vogel - Johnson is het ermee eens dat het een mengsel is tussen de zoute Mannitol Agar en de Baird Parker Agar.

In de eerste S. aureus Ze onderscheiden zich door Fermentol. Aan de andere kant, in de tweede S. aureus Het wordt gekenmerkt door Teluro te reduceren tot teluro en grijze kolonies te vormen tot zwart. Beide eigenschappen worden waargenomen in de Vogel-Johnson Agar.

Dit medium is, net als zijn tegenhangers, handig voor de detectie van Staphylococcus aureus In voedselmonsters, gezondheidscontroles van industriële producten en in klinische monsters.

Basis

Voedingsbijdrage

Het Vogel - Johnson Medium bevat Triptein en gistextract; Beide stoffen bieden aminozuren met lange keten die dienen als koolstof- en stikstofbronnen die nodig zijn voor bacteriegroei. De bacteriën die in dit medium kunnen groeien, zullen de voedingsstoffen van deze stoffen nemen.

Het kan je van dienst zijn: fauna en flora van de Peruaanse Zee

Selectieve kracht

De Vogel - Johnson Agar is in staat om de groei van gram negatieve bacteriën en zelfs enkele positieve gram te remmen, wat de ontwikkeling van positieve coagulase staphylococci bevordert. Remmerstoffen zijn kaliumtelluriet, lithiumchloride en glycine.

Differentiële kracht

De stoffen die dit differentiaal medium maken, zijn mannitol en kalium tellurite. Manitol is een koolhydraat, en wanneer gefermenteerde zuren worden geproduceerd die het medium van rood naar geel maken, wat gebeurt dankzij de aanwezigheid van de rode pH -pH -indicator.

Terwijl de kleurloze teluriet wanneer deze wordt gereduceerd tot metalen vrije teluro, een donkergrijze kleur heeft.

Hij Staphylococcus aureus gist de mannitol en reduceert de Teluro tot Teluro. Dat is de reden waarom de typische kolonies van S. aureus In dit medium zijn ze grijs of zwart omgeven door een geel medium.

Bacteriën die in dit medium groeien en de teluriet niet verminderen of de mannitol vergemakkelijken, zullen transparante kolonies vormen omringd door een rood medium, nog intenser dan de oorspronkelijke kleur, vanwege de alkalinisatie van het medium door het gebruik van peptones.

Aan de andere kant zullen de bacteriën die de teluriet verminderen maar niet de manitol vergroten als grijze of zwarte kolonies omgeven door een intens rood medium.

Als het medium is voorbereid zonder de toevoeging van het kalium -telluriet, de kolonies van S. aureus Ze zouden zich ontwikkelen als gele koloniën, omringd door een geel medium, zoals gebeurt in de zoute mannitol -agar.

Osmotisch evenwicht en solidifieragent

Dipotassiumfosfaat handhaaft de osmotische balans van het medium en past de pH aan neutraliteit 7,2 aan. Terwijl de agar solide consistentie geeft aan het kweekmedium.

Het kan je van dienst zijn: Flora en Fauna vanuit Mexico City

Voorbereiding

1% P/V kaliumtelurietoplossing

Deze oplossing is niet opgenomen in de gedehydrateerde omgeving, omdat deze niet kan worden gesteriliseerd in autoclaaf. Om deze reden wordt het uit elkaar bereikt en toegevoegd aan het medium dat al is gesteriliseerd.

Sommige commerciële huizen verkopen de 1% kaliumtelurietoplossing klaar voor gebruik. Als u zich in het laboratorium wilt voorbereiden, ga dan als volgt verder:

Weeg 1.0 gr van kalium telluriet en meet 100 ml gedestilleerd water. Los de kaliumteluriet op in een deel van het water en voltooi vervolgens de hoeveelheid water totdat deze 100 ml bereikt. Steriliseer de oplossing volgens de filtratiemethode.

Vogel-Johnson Agar Base

Weeg 60 gr van het gedehydrateerde medium en lost op in 1 liter gedestilleerd water. Het mengsel wordt verwarmd om te koken om de volledige oplossing te helpen. Tijdens het oplossingsproces wordt het medium vaak geagiteerd.

Steriliseer 15 minuten in autoclaaf 15 pond druk en 121 ° C gedurende 15 minuten. Verwijder uit de autoclaaf en laat staan ​​totdat het medium een ​​geschatte temperatuur van 45 tot 50 ° C bereikt. Voeg 20 ml van de kaliumtelurietoplossing toe die eerder op 1% is bereid.

Meng en giet op petri -steriele platen. Laat een omgekeerde plaat stollen en bestellen.

De uiteindelijke pH van het voorbereide medium moet op 7,2 ± 0,2 zijn.

Voordat u een monster zaait, moet u wachten tot de plaat de temperatuur van de omgeving neemt.

De kleur van het voorbereide medium is rood.

Gebruik

Hoewel het kan worden gebruikt voor het isoleren van S. aureus In elk type monsters wordt het meestal gebruikt voor de microbiologische analyse van farmaceutische producten, cosmetica en voedsel.

Het kan u van dienst zijn: SGLT (natriumglucosevransporteiwitten)

Het wordt aanbevolen dat het inoculum dicht is. Het zaaien kan worden gedaan door te stralen met platina -handgreep of door oppervlak met Drigalski -spatel.

De platen worden 24 tot 48 uur bij aerobiose geïncubeerd bij 35-37 ° C.

QA

Om kwaliteitscontrole uit te voeren naar de Vogel-Johnson-omgeving kunt u de volgende stammen-besturingselementen gebruiken:

Staphylococcus aureus ATCC 25923, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Escherichia coli ATCC 25922 O Proteus Mirabilis ATCC 43071.

Het verwachte resultaat is als volgt: voor de spanningen van S. aureus bevredigende groei met zwarte kolonies omringd door geel medium. Voor S. epidermidis Regelmatige groei met doorschijnende of zwarte kolonies omringd door rood medium.

Ook om te EN. coli Verwacht wordt dat er totale remming zal zijn, en voor Proteus Mirabilis gedeeltelijke of totale remming; Als het groeit, zal het het nauwelijks doen en de koloniën zullen zwart zijn omringd door rode halve kleur.

Referenties

1. BD Laboratories. VJ (Vogel en Johnson Agar). Beschikbaar op: BD.com
2. Britania Laboratories. Vogel-Johnson Agar. Beschikbaar op: Britanialab.com