Bright Green Agar, fundering, voorbereiding, gebruik

Hij Bright Green Agar Het is een solide kweekmedium, met een hoge mate van selectiviteit. Het wordt uitsluitend gebruikt voor de isolatie van stammen van het geslacht Salmonella; Er zijn echter enkele uitzonderingen, zoals de Typhi- en Parathyphi -soorten die niet in dit medium groeien.

De zoektocht naar het Salmonella -genre komt vaak voor in ontlasting, water of voedselmonsters. In die zin kan dit medium erg nuttig zijn. Deze agar werd opgericht in 1925 door Kristensen, Lester en Jurgens, werd later aangepast door Kauffmann.

Het is samengesteld uit multiplayones uit gedigereerd dierenweefselpeptisch en digreatisch caseïne, bevat ook gistextract, natriumchloride, lactose, sucrose, fenol rood, heldergroen en grip.

Het wordt gekenmerkt door een redelijk onherbergzaam medium te zijn voor de meeste bacteriën, die de voorkeur geven aan de groei van Salmonella, maar sommige coliformen kunnen erin bestaan ​​en zich zwak ontwikkelen.

Het is belangrijk om te benadrukken dat in dit medium het Shigella -genre niet groeit en geen van beide Salmonella Typhimurium, geen van beide Salmonella Paratyphi. Daarom, als u deze micro -organismen wilt isoleren, moeten andere media worden gebruikt, zoals de XLD -agar, onder andere.

Basis

Bright Green Agar

Elk van de componenten waaruit het medium bestaat, vervult een specifieke functie die de kenmerken en eigenschappen van de agar bepalen.

Pluripeptonen en gistextract zijn de bron van voedingsstoffen waarbij micro -organismen stikstof en mineralen nemen die nodig zijn voor hun ontwikkeling. Lactose en sucrose zijn energiebronnen voor micro -organismen die in staat zijn ze te fermenteren.

Bright Green is de remmerstof die de ontwikkeling van gram -positieve bacteriën en een groot aantal gram negatieve micro -organismen voorkomt.

Kan u van dienst zijn: troponine: kenmerken, structuur, functies en tests

Natriumchloride biedt osmotische stabiliteit voor het milieu. Terwijl de rode fenol de pH -indicator is, dezelfde kleur Vira bij het detecteren van de productie van zuren uit koolhydraatfermentatie.

Niet -fermentaire kolonies van lactose en sucrose groeien in dit medium van een witte of transparante witte kleur, op een rode achtergrond. Bijvoorbeeld bacteriën van het Salmonella -geslacht.

Terwijl lactose of sucrose fermenterende bacteriën die in dit medium kunnen groeien, ontwikkelen ze gele of geelachtige gele kleur, op een groenachtige gele achtergrond. Bijvoorbeeld, Escherichia coli en Klebsiella pneumoniae.

Bright Green Agar -varianten (BGA)

Er zijn andere varianten van de heldere groene agar; Bright Green Green Girvobiocin Apar (NBG) en briljante hebzucht groeide Glicerol Avocin Lactose (NBGL).

De felgroene novobiocine agar glucose (NBG)

Het bevat sojabonen soja -landbouw, ijzersterkercitro.

Het wordt gebruikt om salmonella -kolonies te isoleren van ontlastingmonsters.

In dit geval zijn de heldere groene en de novobiocine de remmende stoffen die de groei van gram -positieve bacteriën en sommige gram negatieve micro -organismen voorkomen.

Natriumthiosulfaat is de zwavelbron en ijzercitraat is de ijzerbron, beide noodzakelijk om de productie van waterstofsulfide te onthullen door de vorming van een zwart neerslag van ijzersulfide.

Glucose is fermenteerbaar koolhydraat en fenolrood is de pH -indicator.

In dit medium ontwikkelen de kolonies van Salmonella zich groot met een zwart centrum omgeven door een roodachtige halo en gevolgd door een duidelijk zichtbaar gebied. Enkele stammen van Citrobacter freundii produceren identieke kolonies voor die van Salmonella.

Het kan u van dienst zijn: Flora en Fauna of Durango: Representative Soorten

Briljante glicerol groen groen groen lactose glycerol (NBGL)

Dit medium bevat soja -sojabonen landbouw, ijzersterktecitraat, natriumthiosulfaat, lactose, glycerol, heldergroen, novobiocine en gedestilleerd water.

Het verschil in dit medium met de vorige.

Het medium wordt ook gebruikt om salmonella -soorten te isoleren, de kolonies ontwikkelen zwart, door de productie van waterstofsulfide.

Alleen kolonies die geen zuur produceren van glycerol of lactose bereiken een h₂Voldoende, omdat de pH onder de vorming van h interfereert₂S. Dit resulteert in kleurloze kolonies voor de meeste proteus- en cytrobactersoorten.

Voorbereiding

-Weeg 58 gram van het gedehydrateerde medium dat commercieel wordt verkregen. Voeg het toe in een liter gedraveerde water. Meng, laat een paar minuten staan ​​en stuur de voorbereiding in een warmtebron totdat deze volledig oplost.

-Autoclaaf bij 121 ° C gedurende 15 minuten, overschrijdt de sterilisatietijd niet.

-Laat staan ​​en serveren nog steeds heet op petrisch steriele borden. De uiteindelijke pH moet 6,9 ± 0,2 zijn.

-Laat stollen en opslaan in de koelkast tot gebruik. Voordat ze de borden zaaien, moeten ze kamertemperatuur nemen.

-Het poeder is groen en voorbereid heeft een oranje bruin of roodachtig groenachtige kleur, afhankelijk van de pH en het commerciële huis. Een zeer bruine kleur is een indicatie dat de agar oververhit was.

-Zodra de agar niet is aanbevolen, wordt het niet aanbevolen om opnieuw te bouwen, omdat het medium verslechtert.

Gebruik/toepassingen

Dit medium wordt gebruikt voor de zoektocht naar stammen van het geslacht Salmonella -monsters van onder andere uitwerpselen en zuivelproducten.

Kan u van dienst zijn: fosfatidilserine: structuur, synthese, functies, locatie

Als een redelijk onherbergzaam middel, is het raadzaam om een ​​overvloedig inoculum te zaaien als het directe monster wordt gebruikt. Anders moeten pre-verrijking en verrijking van monsters worden gedaan voordat ze in dit medium zaaien.

Aangezien sommige Salmonella -stammen worden geremd of met moeilijkheden worden geremd, is het raadzaam om dit medium te vergezellen met andere selectieve leeftijden voor Salmonella.

Elke kolonie met een typisch Salmonella -kenmerk moet worden onderworpen aan biochemische tests voor definitieve identificatie.

QA

Om de juiste werking van de heldere groene agar te testen. ATCC -stammen kunnen worden gebruikt om hun ontwikkeling erop te observeren.

De meest voorkomende stammen die worden gebruikt voor kwaliteitscontrole zijn: Salmonella enteritidis ATCC 13076, Salmonella Typhimurium ATCC 14028, Proteus Mirabilis ATCC 43071, Klebsiella pneumoniae ATCC 700603, Escherichia coli ATCC 25922,  Shigella flexneri ATCC 12022, Staphylococcus aureus ATCC 6538.

De eerste 3 moet roze of transparante witte kolonies geven op een rode achtergrond. Salmonella met goede ontwikkeling en proteus met schaarse of regelmatige groei.

Voor Klebsiella en Escherichia worden groenachtige gele kolonies verwacht met gele achtergrond en in het geval van Shigella en Staphylococcus moeten ze worden geremd.

Het gedehydrateerde medium moet worden bewaard bij kamertemperatuur, op een droge plaats, omdat het medium erg hygroscopisch is.

Referenties

1. Britania laboratorium. Bright Green Agar. 
2. BD -laboratorium. BD briljante groene agar.