Vasthouden wat is, fundering, voorbereiding, gebruik

Hij Endo agar of medium endo is een solide, differentiële cultuur en met een zekere mate van selectiviteit. De oorspronkelijke formule is in 1904 door Endo gemaakt om de fermentaire bacteriën van de niet -fermenterende lactose te onderscheiden. Voorletter Salmonella Typhi, Maar later keerde het doel van het medium naar de zoektocht naar coliformen.

Het begin van de endo -agar is gebleven, maar de formulering heeft in de loop der jaren ontelbare veranderingen geleden. Momenteel bestaat het medium uit dierweefsel maag, lactose, waterstofpufflen, natriumsulfiet, basisfuchsine en agar en agar.

Het belangrijkste gebruik van het medium is gekoppeld aan de isolatie en differentiatie van gram negatieve bacillen die behoren tot de familie Enterobacteriaceae en andere nabijgelegen families.

Lange tijd werd het gebruikt bij de detectie van coliformen in watermonsters, zuivelproducten en voedsel, maar vandaag is het gebruik van dit medium ontheemd door anderen van vergelijkbare functies. Sommige microbiologielaboratoria gebruiken deze agar echter tot isolatie van klinische monsters.

Basis

Endo Agar bevat peptonen die dienen als een bron van aminozuren, stikstof, koolstof en energie, noodzakelijk voor de groei van weinig veeleisende micro -organismen.

Aan de andere kant wordt het enigszins selectieve karakter van de agar geleverd door het aggregaat van natriumsulfiet en basisfuchsine; Beide componenten remmen gedeeltelijk of remmen de ontwikkeling van de meest positieve grambacteriën volledig.

Het differentiële karakter wordt gegeven door de aanwezigheid van fermenteerbaar koolhydraat, dat in dit geval lactose is en basisfuchsine, die ook dient als een pH -indicator.

Kan u van dienst zijn: tactisme

Gram negatieve bacteriën die groeien in deze agar en in staat zijn om lactose te gisten, zullen sterke roze kolonies vormen; pathognomonisch zijn van Escherichia coli De vorming van donkere rode kolonies met een groenachtige metalen glans. Dit is te wijten aan een hoge zure productie van koolhydraatfermentatie.

Opgemerkt moet worden dat het medium dat rond de koloniën wordt gevonden ook een sterke roze kleur verandert. Terwijl gram negatieve bacillen niet -fermenterende lactose vormt lichtroze kolonies vergelijkbaar met het medium of kleurloos.

De waterstof dopotassiumfosfaat balanceert de pH van het medium en de agar is de component die de vaste consistentie biedt.

Voorbereiding

Endo agar

Weeg 41,5 gr van het uitgedroogde medium en lost op in 1 liter gedestilleerd water. Verhit het mengsel regelmatig roeren totdat er totale medium oplossing is. Steriliseer in autoclaaf bij 121 ° C, 15 lb druk, gedurende 15 minuten.

Wanneer u uit de autoclaaf haalt, laat u afkoelen tot een geschatte temperatuur van 45-50 ° C, schud het mengsel om te homogeniseren voordat u wordt geserveerd. Giet 20 ml in petri -steriele platen.

Laat de platen stollen, investeren en opslaan in plaque of wikkel met donker papier voordat u in de koelkast bespaart. Het is erg belangrijk om de voorbereide omgeving te beschermen tegen direct licht. Een aanbevolen praktijk is om het exacte bedrag voor te bereiden dat nodig is.

Indien opgeslagen in een koelkast, moeten de platen mogen temperen voordat ze worden gebruikt.

De middelgrote pH moet tussen 7,2 en 7,6 zijn en de kleur van het voorbereide medium is een lichtroze kleur.

M-ENDO-agent

Er is een andere versie van de endo-agar (M-ENDO) die volgt op de McCarthy-, Delaney- en Grasso-formule, die meer verbindingen bevat en varieert in de vorm van voorbereiding.

Het kan u van dienst zijn: Zygote: classificatie, training, ontwikkeling en segmentatie

Deze variant bevat: lactose, triptose, gedigereerd caseïne -enzymatisch, dierweefsel -enzym, natriumchloride, dibásisch kaliumfosfaat, natriumsulfiet, gistextract, monobasisch kaliumfosfaat, basiS -fuchsine, natrium lay -out, lauriersulfaat natrium en agar.

In dit geval weegt en wordt 51 gr van het uitgedroogde medium weegt en gesuspendeerd in 1 liter gedestilleerd water dat 20 ml ethanol bevat.

Verwarm enigszins terwijl je roer om het medium volledig op te lossen. Het mag niet oververhit raken en ofwel steriliseren in autoclaaf. Zodra het mengsel homogeen is, serveer je in petri -steriele platen en laat het stollen.

Gebruik

In sommige landen wordt het nog steeds gebruikt om totale en fecale coliformen in water- en voedselmonsters te tellen, vooral de aanwezigheid van Escherichia coli Als de belangrijkste indicator van fecale besmetting.

De M-Endo Agar wordt aanbevolen door de American Public Health Association (APHA) voor de monitoring en controle van afvalwaterdesinfectie- en behandelingsprogramma's, evenals bij de evaluatie van de kwaliteit van drinkwater.

De meest gebruikte methode is membraanfiltratie, voorafgaande verrijking van het monster met laurylsulfaatbouillon gedurende 2 tot 4 uur.

Het kan ook worden gebruikt als vervanging voor de embi -agar in de microbiologische analyse van voedsel en water door de meest waarschijnlijke getaltechniek (NMP), met name in de volledige bevestigende fase om de aanwezigheid van te bevestigen EN. coli van duistere EC -bouillons.

QA

Om de kwaliteit van het einde van de voorbereiding te evalueren, worden bekende of gecertificeerde bedieningselementen gezaaid.

Onder de stammen die voor dit doel kunnen worden gebruikt, zijn: Escherichia coli ATCC 25922, Escherichia coli ATCC 11775, Enterobacter riool ATCC 13047, Klebsiella pneumoniae ATCC 13883, Salmonella Typhimurium ATCC 14028, Shigella flexneri ATCC 12022, Proteus Mirabilis ATCC 14153 en Enterococcus faecalis ATCC 11700.

Het kan u van dienst zijn: Flora en Fauna van de Andes -regio: representatieve soorten

De stammen worden gezaaid door uitputting en 24 uur bij 37 ° C geïncubeerd in aerobiose.

De verwachte resultaten zijn:

• Voor Escherichia coli: Sterke rode kolonies, met metalen glans.
• Voor EN. Cloacae En K. longontsteking De kolonies moeten roze mucoïden zijn.
• In het geval van s. Typhimurium, s. Flexneri en p. Mirabilis De kolonies zijn meestal lichtroze of kleurloos.
• Eindelijk, EN. Faecalis Verwacht wordt dat het gedeeltelijk wordt geremd, daarom moet de groei ervan slecht zijn met zeer kleine roze kolonies.

Beperkingen

-Het endo -medium heeft onder selectieve kracht, daarom kan het sommige gram -positieve micro -organismen laten groeien zoals Staphylococcus, Enterococcus en zelfs gisten.

-Andere bacillen die niet tot de familie Enterobacteriaceae behoren, kunnen zich in dit medium ontwikkelen, zoals Pseudomonas sp En Aeromonas SP. De kenmerken van deze stammen zijn kleurloze onregelmatige kolonies.

-Dit voorbereide medium is zeer gevoelig voor licht, daarom een ​​langdurige blootstelling aan deze verslechtering van het indicatorsysteem, die de omgeving onomkeerbaar beschadigt.

-De middelgrote componenten worden als carcinogeen beschouwd, dus direct contact moet worden vermeden.

-Het gedehydrateerde medium is zeer hygroscopisch en moet worden gehandhaafd in zijn oorspronkelijke container bij kamertemperatuur, goed gesloten en in een droge omgeving.

Referenties

1. BD Laboratories. Endo agar. Beschikbaar op: BD.com
2. Neogen Laboratories. Ik ben agar. Beschikbaar op: Foodsafety.Neogen.com