Bhi agar wat is, fundering, voorbereiding, gebruik

Hij BHI Agar O hersenhartinfusie. Het is een voedzame vaste kweekmedium. In het Spaans noemen we hem een ​​infusie cerebro hart agar. Het is een niet -selectief kweekmedium, wat betekent dat allerlei gram positieve en gram negatieve bacteriën kunnen worden ontwikkeld, evenals wat gist en filamenteuze schimmels.

Het is samengesteld uit herseninfusie en kalfsvlees hart, peptische hydrolys voor dieren.

Opgemerkt moet worden dat BHI Agar een van de meest voorkomende kweekmedia is in bacteriologielaboratoria. Het kan zonder supplementen worden gebruikt als een primair, subjectief van kolonies verkregen in andere selectieve media of voor het onderhoud van stammen in het laboratorium.

Aan de andere kant is het een ideaal middel om te worden gebruikt als basis bij het bereiden van verrijkte media, zoals bloedagar en chocolade -agar. Beide idealen om veeleisende micro -organismen te isoleren vanuit voedingsoogpunt. Er moet echter rekening mee worden gehouden dat het, aangezien het glucose bevat, niet geschikt is voor het observeren van hemolysepatronen.

Evenzo kan de BHI -agar worden gebruikt voor het bereiden van speciale middelen voor het isolement van pathogene micro -organismen van moeilijke groei in de gemeenschappelijke media, waaronder: Haemophilus SP, Francisella tularensis, Corynebacterium difteriae en histoplasma capsulatum.

Met het antibiotische additief wordt de BHI -agar een selectief medium voor schimmelisolatie.

Basis

Het is een voedzaam kweekmedium om matig veeleisende micro -organismen te isoleren, waardoor de verrijking zijn verrijking kan vergroten met de toevoeging van bloed en andere voedzame supplementen.

Het is een niet -selectief kweekmedium, maakt daarom de groei mogelijk van de meest positieve en gram negatieve bacteriën, evenals sommige schimmels. Het kan echter selectief worden met de toevoeging van antibiotica.

Het medium bevat infusie van hersenen en kalfsvlees, gehydrolyseerd dierweefsel en gehydrolyseerd pancreas caseïneweefsel; Al deze verbindingen werken als bronnen van vitamines, aminozuren, stikstof en koolstof.

Kan u dienen: Flora en Fauna of Entre Ríos: Representative Soorten

Glucose is een koolhydraat dat energie levert aan micro -organismen zodra ze het hebben gefermenteerd. Terwijl natriumchloride en dinatriumfosfaat de osmotische balans behouden en een pH bieden die dicht bij neutraliteit ligt. Ten slotte geeft de agar solide consistentie aan de omgeving.

Voorbereiding

Weeg 52 gram van het uitgedroogde medium en lost op in een liter gedestilleerd water. Breng het mengsel naar een warmtebron tot het kookt, en agiteert vaak tijdens het oplossingsproces.

U kunt wiggen of BHI -agarplaten voorbereiden zonder additieven.

Wiggen

Serveer voor de wigbereiding de voorbereiding totdat ze de helft van elke buis vullen, dek af en steriliseren in autoclaaf bij 121 ° C gedurende 15 minuten, wanneer ze op een basis naar bed gaan totdat ze stollen. Houd vervolgens tot gebruik in de koelkast.

BHI -wiggen voor bacteroteca. Bron: Foto gemaakt door de MSC -auteur. Marielsa Gil.

Borden

Het opgeloste mengsel is 15 minuten autoclava bij 121 ° C, wanneer het vertrekt, het is toegestaan ​​om tot 50 ° C te koelen en wordt 20 ml van het medium geserveerd in petrisch steriele platen. Ze mogen stollen, worden geïnvesteerd en opgeslagen in een koelkast totdat ze gebruiken. Laat de platen de omgevingstemperatuur nemen voordat ze zaaien.

De middelgrote pH moet 7,4 ± 0,2 zijn.

Het onvoorbereide medium is beige en voorbereid is licht barnsteen.

Bloedagar

Koel na het steriliseren van het medium tot een geschatte temperatuur van 45 tot 50 ° C, voeg op dat moment het bloed (50 ml) toe, meng zachtjes om te homogeniseren en serveer 20 ml op elke petrischplaat. Als bubbels op de plaat worden gevormd, moet de lichtere vlam op de bubbels om ze te verwijderen snel worden doorgegeven.

Evenzo kunnen speciale media worden voorbereid door de overeenkomstige additieven toe te voegen wanneer het mengsel de temperatuur van 45 tot 50 ° C bereikt.

Kan u van dienst zijn: fysieke mogelijkheden

Het medium is kersenrood.

Toepassingen

Gebruik zonder supplementen

De BHI -agar zonder additieven is nuttig als een primaire teelt en om pure stammen van micro -organismen te zaaien weinig of matig eisend naar zijn daaropvolgende identificatie.

Omdat het een licht kleurmedium is, is het ideaal voor de observatie van pigmenten en ook door geen interferentiële stoffen te bevatten, sommige biochemische tests, zoals oxidase en catalase, of andere biochemische tests van kolonies van deze agar monteren.

Evenzo zijn BHI Agar breed.

De platen of wiggen geplant door oppervlak met bacteriestammen worden 24 tot 48 uur bij 37 ° C geïncubeerd. Terwijl in schimmels de temperatuur- en incubatietijd afhangt van het type schimmel dat wordt gevraagd.

Als basisagar voor de voorbereiding van andere media

Met deze basis kunt u verrijkte en selectieve media voorbereiden.

Verrijkt

De belangrijkste functie ervan is om te dienen als basis bij de bereiding van het routine -gebruik bloed in microbiologielaboratoria. Vooral de BHI -basis is bevorderlijk voor het isolement van stammen van Streptococcus SP. Het heeft echter het ongemak om niet voldoende te zijn voor de observatie van hemolysepatronen door glucose te bevatten.

Het wordt ook gebruikt bij de bereiding van konijnen of paardenbloed Haemophilus SP. Voor betere resultaten kunt u een verrijkingssupplement toevoegen (Isavalex).

Als de monsters afkomstig zijn van de luchtwegen naar de agar, kan bacitracine worden toegevoegd om de bijbehorende flora te remmen en de kans op herstel van de spanningen van de stammen van de spanningen te vergroten Haemophilus SP.

Aan de andere kant kunt u bloed (lam of mens) bereiden met Cistina Tellurito om te isoleren Corynebacterium difteriae. Evenzo is het nuttig voor het bereiden van konijnenbloed, met het aggregaat van cistine en glucose voor de isolatie van Francisella tularensis.

Het zaaien van bloedagarplaten wordt gedaan door uitputting en 24-48 uur bij 35-37 ° C geïncubeerd in microaerofilie (5-10% van CO₂)).

Kan u van dienst zijn: fylogenetische boom: typen en hun kenmerken, voorbeelden

Selectief

Dit medium met het aggregaat van antibiotica kan de Sabouraud -agar vervangen voor schimmelisolatie.

De BHI -agar gecombineerd met chlooramfenicol - gentamycine of penicilline -, streptomycine en paardenbloed is ideaal voor isolatie van Histoplasma capsulatum.

Afhankelijk van het micro-organisme dat wordt gezocht om de incubatie te isoleren bij 35-37 ° C of bij kamertemperatuur bij aerobiose. Soms is incubatie in beide temperatuurbereiken nodig, met behulp van 2 platen hiervoor.

Sommige schimmels zoals Trichophyton mentagrofytes Ze moeten maximaal 7 dagen bij kamertemperatuur worden geïncubeerd.

QA

Van elk voorbereid perceel wordt het aanbevolen om 1 plaat of wig gedurende 24 uur bij 37 ° C te incuberen en te controleren of er geen groei is; Vooral het is belangrijk bij het bereiden van bloed, omdat het een gemakkelijk besmettelijk medium is.

Anderzijds kan de kwaliteit van het medium worden geëvalueerd om bekende of gecertificeerde patronenstammen te inoculeren en de ontwikkeling ervan te observeren.

In die zin, om BHI -agar te evalueren zonder additieven, kunt u stammen gebruiken Escherichia coli ATCC 25922, Staphylococcus aureus ATCC 25923 O Candida albicans ATCC 10231. 37 ° C worden 24 tot 48 uur geïncubeerd in aerobiose. In alle gevallen wordt een bevredigende groei verwacht.

Om bloedagarplaten te evalueren, kunt u stammen zaaien  Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 of Trichophyton mentagrophytes ATCC 9533.

Bacteriestammen worden 24 uur geïncubeerd bij 37 ° C in microaerofilie, terwijl de schimmel bij kamertemperatuur in vochtige kamer tot 7 dagen incubeert. In alle gevallen wordt een bevredigende groei verwacht.

Referenties

1. Britania Laboratories. Hersen hartinfusie agar. Beschikbaar op: Britanialab.com.
2. BD Laboratories. Hersenhartinfusie (BHI) agar. Beschikbaar op: BD.com.