Czapek -kop, voorbereiding, gebruik en beperkingen

Hij Czapek Agar (CZA) is een selectief vaste kweekmedium dat speciaal is ontworpen voor de teelt van bacteriën en saprofytes Fungi. Het werd gemaakt door botanicus Friedrich Johann Franz Czapek, van Poolse afkomst, en de Amerikaanse chemicus Arthur Wayland Dox; Dat is de reden waarom deze agar ook bekend staat als Czapek-Dox-helft.

Het oorspronkelijke medium was vloeistof, maar later werd agar toegevoegd om een ​​vast medium te doen. Het czapek -medium bestaat uit natriumnitraat, bipotasisch fosfaat, magnesiumsulfaat, kaliumchloride, ferro sulfaat, sucrose, agar en gedestilleerd water.

Czapek a. Aspergillus parasiticus B. Aspergillus fumigatus bron: a. MedMyco [CC BY-SA 4.0 (https: // creativeCommons.Org/licenties/by-sa/4.0)]/ B. Foto: DR. David Midgley. Wikipedia.com

De Czapek Agar is 7.3, maar er is een variant waaraan 10% melkzuur wordt toegevoegd waarvan de pH 3,5 is. Dit zure medium wordt gebruikt voor de teelt van acidofiele micro -organismen.

Aan de andere kant hebben sommige commerciële huizen de samenstelling van de czapek -agar gewijzigd door magnesiumsulfaat en bipotasisch fosfaat door glyceofosfaat te veranderen; Deze modificatie voorkomt het neerslag van magnesiumfosfaat waargenomen met de conventionele formule. Evenzo is er een andere variant waaraan gistuittreksel wordt toegevoegd.

Ten slotte wordt Czapek Agar aanbevolen door de American Public Health Association APHA voor de studie van Actinomycetes SP, Aspergillus SP, Paecilomyces SP En Penicillium SP. Deze soorten worden gekenmerkt door micro -organismen van het milieu en opportunistische ziekteverwekkers.

[TOC]

Basis

Dit medium bevat sucrose; Deze koolhydraat dient als een koolstofbron, terwijl natriumnitraat de bron van stikstof is, maar in tegenstelling tot andere middelen is de geleverde stikstof anorganisch type.

Om deze reden wordt het Czapek -medium als selectief beschouwd, omdat het alleen micro -organismen kan ontwikkelen die in staat zijn om anorganische verbindingen te gebruiken als de enige bron van stikstof.

Als regulerende substantie van de medium osmolariteit is het bipotasische fosfaat. Aan de andere kant bieden magnesiumsulfaat, kaliumchloride en ferro sulfaat essentiële mineralen voor de groei van saprofyten micro -organismen (vrij leven). Met deze formule wordt een neerslag van magnesiumfosfaat gevormd.

Het kan u van dienst zijn: Agar Standard Account: Foundation, Preparation and Use

Ten slotte is de agar-adding de verbinding die de vaste consistentie voor het milieu biedt en het water is het oplosmiddel van alle componenten.

Met de gemodificeerde Czapek -agarformule is er geen neerslagvorming en verbetert de groei van de groei van sommige schimmels.

De extreme zuurgraad van de czapek zure agar maakt dit een selectiever middel, waardoor alleen de groei van acidofiele micro -organismen, in staat om anorganische stikstof te gebruiken. Terwijl Czapek-Levadura Agar de prestaties van bepaalde schimmels verbetert.

Voorbereiding

Half Czapek-Dox

Weeg 49 gr van gedehydrateerde cultuur en lost op in gedestilleerd water. Breng warmte aan op kook. Schud het mengsel regelmatig tot het volledig is opgelost.

-Czapek Agar

Verdeel het mengsel opgelost in buizen en autoclavaat gedurende 15 minuten bij 121 ° C. Wanneer u uit de autoclaaf haalt, homogeneer voor het slapengaan en laat het stollen.

-Czapek Agar -platen

Autoclavaat het mengsel opgelost bij 121 ° C gedurende 15 minuten en bij het laten afkoelen van 50 ° C, het homogeniseren en gieten van 20 ml in steriele petri. Laat stollen, investeren en opslaan in de koelkast tot gebruik.

De pH moet 7,3 ± 0,2 zijn. De kleur van het gedehydrateerde medium is wit en bereid is licht barnsteen, enigszins bewolkt vanwege de aanwezigheid van een vlokbaar neerslag.

Half czapek een pH -zuur

Bereid je voor zoals beschreven, maar voeg 10 ml steriel steriel zuur toe aan 10% voor elke liter bereide medium. Het gemodificeerde Czapek -medium moet op pH 3,5 ± 0,2 zijn.

Half gemodificeerde czapek

Weeg 45,4 gr van het gedehydrateerde medium en lost op in 1 liter water. De rest van de voorbereiding is gelijk aan die hierboven beschreven. De kleur van het uitgedroogde medium is wit en bereid is witachtige kleur. De uiteindelijke pH van het medium is 6,8 ± 0,2.

Het kan u van dienst zijn: vimentin: kenmerken, structuur, functies en gebruik

Half Czapek-Levadura

Ook wel czapek-extract van gist genoemd (CYA). Bevat de elementen van het klassieke Czapek Agar plus gistuittreksel.

Gebruik

Het Czapek -medium wordt gebruikt om te zoeken naar saprofyten micro -organismen in bodemmonsters, groenten, granen, lucht, insecten, onder andere.

Czapek Een zure agar wordt gebruikt voor de groei van acidofiele micro -organismen, terwijl gemodificeerde czapek -agar vooral nuttig is voor de vorming van clamidospores in complexe soorten Candida albicans.

Ten slotte is de Czapek -volvadura -agar zeer nuttig voor de isolatie van Aspergillus en Penicillium.

Gezaaid

-Czapek Agar

Om actinomyceten op de grond te zoeken, ga als volgt verder: het monster met water gefenoliseerd met 30 minuten wordt behandeld en vervolgens wordt 1 ml van de suspensie in de czapek -agar geplant. Incubeert 5 tot 7 dagen bij 28 ° C.

Voor groente, graan en insectenmonsters worden ze direct op de agar geplaatst. Verdunningen kunnen ook worden gedaan en 0,1 ml zaaien op het oppervlak van de agar.

-Gemodificeerde czapek -agar

Voor de gezaaide wordt een rechte hand of naald gebruikt, deze is doordrongen van het wattenstaafje en inoculeert de schep die een lekke band maakt totdat het de basis van de plaat aanraakt. Incubeer gedurende 24 uur bij 28 ° C en onderzoek met een microscoop boven en onder de plaat om te observeren of de clamidospores zich hebben gevormd.

Incubatietemperatuur en tijd

De temperatuur- en incubatietijd variëren afhankelijk van het type micro -organisme dat wordt gezocht om te isoleren. Meestal worden de platen één tot twee weken geïncubeerd in een temperatuurbereik van 20 tot 25 ° C.

Er zijn echter specifieke voorwaarden voor sommige stammen. De meeste soorten van het geslacht Aspergillus hebben bijvoorbeeld een optimale groei bij 30 ° C; Echter NAAR. fumigatus groeien bij 50 ° C.

Wat betreft de incubatietijd is een of twee weken echter normaal Candida albicans Het kan zich binnen 24 tot 48 uur bij 25 ° C ontwikkelen.

Kan u dienen: lipogenese: kenmerken, functies en reacties

Kenmerken van sommige kolonies in dit medium

-Penicillium atravenetum

Het vindt plaats in 12 dagen incubatie bij 27 ° C. De kolonies zijn klein (25 mm).

De kolonies zien er velistend uit, met een wit gedefinieerde rand en in het midden presenteert het een groenachtige blauwe toon die overeenkomt wordt grijs. Het omgekeerde van de kolonie is oranje en plaatst in het midden van dezelfde kleur door pigmentproductie.

-Aspergillus niger

Het ontwikkelt zich met een witte tot geel mycelium en zwarte sporen.

-Candida albicans

Romige beige lichte kolonies ontwikkelen zich duidelijk. In de gemodificeerde czapek agar vormvorm.

-Aspergillus parasiticus

Een donkergroen mycelium ontwikkelt zich in 7 dagen bij 25 ° C.

QA

Om de kwaliteit van het kweekmedium te evalueren, kunnen gecertificeerde controlestammen worden gezaaid, zoals: Aspergillus niger MKTA 16404, Candida albicans MKTA 10231.

Aspergillus niger ontwikkelt een witte tot gele mycelium en zwarte sporen in ongeveer 5 dagen, terwijl Candida albicans Het zal een bevredigende groei hebben in 24 uur incubatie bij 25 ° C; De kolonies zijn crèmekleur.

Beperkingen

Sommige studies hebben aangetoond dat voor het herstel van actinomyceten de agar met de beste prestaties de paus dextrose -agar is, waardoor de Czapek -agar op de tweede plaats blijft, maar voor het herstel van Aspergillus en Penicillium is de Czapek Agar degene die het grootste herstel biedt tarief.

Referenties

1. Dávila M, et al. Antagonistische actinomyceten tegen fytopathogene schimmels van landbouwbelang. Revisie. Mex. wetenschap. landbouw 2013, 4 (8): 1187-1196. Beschikbaar bij: Scielo.borg.
2. Luna M, Lozada en, tarwe. Isolatie van stammen van Aspergillus niger, Ocratoxin A -producenten, in Café Verde (Arabica Coffea) opgeslagen. Revisie. Mex. Microfoon . 2010; 32: 63-68. Beschikbaar in.Scielo.borg.
3. Wikipedia -bijdragers. Czapek Medum. Wikipedia, de gratis encyclopedie. 13 januari 2019, 20:30 UTC. Beschikbaar op: in.Wikipedia.borg
4. Conda pronadisa laboratoria. Gemodificeerde czapek-dox agar. Beschikbaar bij: Condalab.com
5. Microkit -teeltmedia. Czapek-dox agar. Godponibel in: Media Cultutive.com