Gestreepte agar

Corynebacterium stratum op gestreepte agar. Bron: Nathan Reading from Halesowen, UK, CC door 2.0, Wikimedia Commons

Wat is de bekledde agar?

Hij Gestreepte agar (Cistine-lactose-elektrolytes-defficiënt) is een differentiële vaste kweekgemiddelde, gebruikt voor de diagnose van urineweginfecties. De samenstelling van het kweekmedium is ontworpen voor de goede groei van urinepathogenen en is ideaal voor de kwantificering van dikke darmvormige eenheden (UFC).

Het bekledde kweekmedium is niet -selectief, omdat gram -negatieve en gram -positieve micro -organismen erin kunnen groeien. Maar dit is geen probleem, omdat de meeste urine -infecties worden veroorzaakt door een enkel type micro -organisme.

In het geval van polymicrobiële infecties kunnen 2 of 3 verschillende bacteriën worden bereikt, maar het is zeer zeldzaam en meestal zijn ze besmette monsters.

Onder de gram -negatieve bacteriën die in dit medium kunnen groeien, zijn de bacillen die behoren tot de familie Enterobacteriaceae en andere enterische bacillen, die de meest geïsoleerde uroopathogenen in urinemonsters zijn: Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, proteus mirabilis, Morganella morganii, Pseudomonas aeruginosa, onder andere.

Ook zijn onder de gram -positieve bacteriën die in dit medium kunnen groeien, Staphylococcus aureus, Staphylococcus saprofytisch, enterococcus faecalis, streptococcus agalactiae, chorynebacterium SP, lactobacillus sp En ze kunnen zelfs gisten verbouwen, zoals complex Candida albicans.

Vanwege de chemische samenstelling van het milieu staat dit echter niet de groei toe van sommige veeleisende urogenitale pathogenen, zoals Neisseria gonorrhoeae, Gardnerella Vaginalis, onder andere.

Foundation of the Cled Agar

Het gecled kweekmedium heeft een bron van energie -extract van vlees, gehydrolyseerde caseïne en gehydrolyseerde gelatinehydrolysz. Ze bieden voedingsstoffen voor de ontwikkeling van weinig veeleisende bacteriën.

Het bevat ook cystine, een aminozuur dat de groei van coliformen mogelijk maakt, te onderscheiden door zijn kleine omvang.

Kan u van dienst zijn: virulentiefactoren

Het bevat ook als een fermenteerbare koolhydraatlactose, dus deze media is verschillen.

Fermenterende bacteriën draaien de middelgrote pH door zure productie, ontwikkelende gele kolonies, terwijl niet -fermenterende bacteriën geen veranderingen in het medium genereren, daarom nemen ze de kleur van de originele agar, groene kleur.

De fermentatiereactie wordt onthuld dankzij de aanwezigheid van de pH -indicator, die in dit medium bromotimol blauw is.

Aan de andere kant remt de lage concentratie van middelgrote elektrolyten de typische invasieve groei van het geslacht Proteus, Swarming Effect genoemd. Dit genereert een voordeel ten opzichte van andere media, omdat het toestaat het tellen van de UFC, inclusief of het geslacht aanwezig is Proteus.

De lage elektrolytconcentratie remt echter de groei van sommige soorten van het geslacht Shigella, Dit is een nadeel met betrekking tot andere media.

Foundation of the Cled Agar (Bevis)

Er is een variant of aanpassing van dit medium, gemaakt door Bevis, die de originele zure fuchsinesamenstelling (Andrade) heeft opgenomen. Hetzelfde werkt samen met bromotimol blauw om de fermenterende bacteriën te onderscheiden van niet -fermenteren.

Het verschil tussen de conventionele en de gemodificeerde omgeving is de kleur die de koloniën aannemen. In het geval van lactose-fermenterende bacteriën, verwerven de kolonies een roodachtige oranje kleur met een roze of rode halo, terwijl niet-fermenteren grijs-jaw zijn.

Toepassingen

Gedekte agar wordt gebruikt uitsluitend Voor monsters van urinemonsters. Het gebruik van dit medium komt vooral voor in Europese laboratoria, terwijl het in Amerika minder wordt gebruikt.

Kan u van dienst zijn: amensalisme: kenmerken, voorbeelden, verschillen met dinerisme

De verzameling van het monster moet aan bepaalde parameters voldoen om betrouwbare resultaten te verkrijgen, waaronder:

Geen antibiotica nemen voordat het sample nemen.

Neem bij voorkeur de urine van het eerste uur van de ochtend, omdat deze meer geconcentreerd is, wanneer het niet mogelijk is om een ​​monster te nemen door invasieve methoden.

Was de geslachtsdelen goed voordat u het monster neemt.

Gooi de eerste straal van urineren weg en plaats vervolgens de container.

Verzamel tussen 25 en 30 ml van de urine in een goed gelabelde steriele container.

Neem onmiddellijk het laboratorium omringd op ijs.

Het moet worden verwerkt vóór 2 uur uitgegeven of gekoeld bij 4 ° C gedurende maximaal 24 uur.

Urinemonsters

Het urinemonster moet 1:50 worden verdund.

Voor verdunning, colloqar 0,5 ml patiënt urine en verdunnen met 24,5 ml steriele fysiologische oplossing. Meet 0,1 ml van de urine verdund en gezaaid door oppervlak met drigalski spatel op het gecled medium.

Dit is de aangegeven gezaaide methode om kolonies te tellen. Daarom wordt het gebruikt in urinemonsters, omdat de resultaten moeten worden uitgedrukt in UFC/ml.

Ga als volgt voor de kwantificering van de verkregen kolonies: tel de kolonies van de plaat en vermenigvuldig met 10 en vervolgens met 50. Dit is de hoeveelheid UFC/ml urine.

Interpretatie

Entiteiten boven 100.000 UFC/ML -Indica Urine -infectie.

Onder de 1000 UFC/ml- Er is geen infectie.

Tussen 1000-10.000 UFC/ml -dudoso, mogelijke verontreiniging, herhaalmonster.

ID kaart

Er moet een gram worden gemaakt aan de gekweekte kolonies die zijn gekweekt.

Kan u bedienen: Catalase: kenmerken, structuur, functies, pathologieën

Als het bijvoorbeeld een gram -negatieve bacil is, wordt het op een MacConkey -agar gezaaid, waarbij gisting of niet van lactose wordt bevestigd. Bovendien is een voedzame agar gehecht om de oxidasetest uit te voeren.

In het geval dat Gram gram -positieve kokosnoten onthult, kan het worden onderworpen aan zoute Mannitol -agar en voedzame agar. In het laatste geval wordt de catalasetest uitgevoerd. Ten slotte, als gisten worden waargenomen, wordt het op een Sabouraud -agar gezaaid.

Veel laboratoria negeren het gebruik van het geknotte medium en geven er de voorkeur aan om alleen bloed, macconkey en voedzame agar te gebruiken om urinemonsters te zaaien.

Voorbereiding

Los in een felola met een liter gedestilleerd water 36,2 gram poederagar op. Verwarm na 5 minuten rust de resuspected agar, meng constant totdat deze 1 minuut kookt.

Steriliseer vervolgens 15 minuten bij 121 ° C in de autoclaaf. Voltooide tijd, trek je terug uit de autoclaaf en laat afkoelen totdat een temperatuur van 45 ° C is bereikt. Vervolgens wordt het tussen 15-20 ml geserveerd op elke steriele Petri.

De PLATES -procedure moet worden uitgevoerd in een laminaire stroombel of voor Bunsen's Lighter, om besmetting te voorkomen.

De geserveerde platen mogen stollen, in een omgekeerde vorm bestellen en tot gebruik in een koelkast (2-8 ° C) worden opgeslagen.

De uiteindelijke pH van het voorbereide medium moet op 7,3 ± 0,2 zijn.

Referenties

1. Aanbevelingen voor de microbiologische diagnose van urine -infectie. Kanker. Infectol. Hersteld van Scielo.borg.
2. Halfgeslagen. Hersteld van Britanialab.com.