Baird Parker Agar Wat is, fundering, voorbereiding, gebruik

Hij Baird Parker Agar of eierdooieragar is een solide, selectieve en differentiële kweekmedium. Het werd opgericht in 1962 voor de detectie en telling van positieve coagulase Staphylococci (Staphylococcus aureus)).

Het is samengesteld uit pancreas caseïne gehydrolyseerd, vleesextract, gistextract, lithiumchloride, glycine, natriumpyruvaat, kaliumteluriet, greep en eidooieremulsie.

Typische kolonies van Staphylococcus aureus in Baird Parker veroudering. Bron: Daizy John [CC door 4.0 (https: // creativeCommons.Org/licenties/door/4.0)]

Baird Parker Agar is gebaseerd op de capaciteit van de S. aureus om Telurito te verminderen en lecithinase te produceren. Beide eigenschappen genereren een kolonie met specifieke kenmerken voor deze soort. Daarom biedt het een grote effectiviteit bij de detectie van deze micro -organisme.

De typische kolonies van S. aureus Ze zijn zwart of donkergrijs, met kleurloze rand en een heldere halo die hen omringt, onderscheiden van de rest van micro -organismen. Deze ziekteverwekker is te vinden in klinische monsters, wateren, cosmetica en rauw of gekookt voedsel.

De diagnose of detectie ervan is van het grootste belang, vanwege de verscheidenheid aan pathologieën die het produceert, zoals voedselvergiftiging, verbrand huidsyndroom, toxisch schoksyndroom, abcessen, meningitis, septicemie, endocarditis, onder andere.

Basis

Voedingskracht

Caseïne pancreas gehydrolyseerd, vleesextract en gistextract zijn de bronnen van voedingsstoffen, vitamines en mineralen die nodig zijn voor microbiële algemene ontwikkeling, terwijl pyruvaat en glycine verbindingen zijn die de specifieke groei van Staphylococcus aureus.

Selectief

De Baird Parker Agar is selectief omdat het stoffen bevat die de groei van de bijbehorende flora belemmeren, terwijl hij de ontwikkeling van de ontwikkeling van S. aureus. Remmende verbindingen zijn lithiumchloride en kaliumvertelliet.

Differentiaal

Dit medium maakt het mogelijk om de S. aureus van de rest van de negatieve coagulase Staphylococci. S. aureus Het heeft de mogelijkheid om de teluriet te verminderen tot zwarte metalen teluro, waardoor zwarte of donkergrijze kolonies worden gevormd.

Evenzo biedt de eierdooier de substraten om de aanwezigheid van het lectinase en Lipasa -enzym aan te tonen. S. aureus Het is positief lecithinase en daarom zal een duidelijke halo worden waargenomen rond de kolonie, wat aangeeft dat het lecithine was gehydrolyseerd.

Kan u van dienst zijn: kieuw ademhaling: hoe het wordt gedaan en voorbeelden

In die zin lijkt het uiterlijk in deze zwarte of heldere zwarte of grijs -gray dikke darm S. aureus. 

Als een neerslagzone wordt gevormd, is dit een indicatie dat er activiteit van de lipase is. Enkele stammen van S. aureus Ze zijn positief en andere negatieve lipase.

In het geval dat de S. aureus Wees een positieve lipase, een ondoorzichtig gebied zal worden waargenomen rond de zwarte of donkergrijze kolonie, en vervolgens de heldere halo voor de werking van de lecithinase.

De kolonies van bacteriën anders dan S. aureus In staat om in dit medium te groeien, zullen ze kleurloze of bruine kolonies ontwikkelen, zonder halo in de buurt.

U kunt ook atypische zwarte kolonies observeren met of zonder kleurloze rand, maar zonder lichte halo. Deze kolonies moeten niet in aanmerking worden genomen, ze komen niet overeen met S. aureus.

Voorbereiding

Eierdooieremulsie

Er wordt een koel kippenei genomen, dwaalde goed en werd 2 tot 3 uur geplaatst in 70% alcohol. Vervolgens opent het ei aseptisch en scheidt de heldere van de dooier zorgvuldig. Vervolgens worden 50 ml van de dooier genomen en gemengd met 50 ml steriele fysiologische oplossing.

1% p/v kalium tellto

Sommige commerciële huizen verkopen 1% poetassium teluro klaar voor gebruik. Het wordt aan het medium toegevoegd voordat de middelen stolt.

Om deze oplossing in het laboratorium voor te bereiden, 1.0 gr van kalium telluriet en lost op in een deel van water. Vervolgens wordt de hoeveelheid water voltooid totdat deze 100 ml bereikt. De oplossing moet worden gesteriliseerd door de filtratiemethode.

Bereiding van kweekmedium

Weeg 60 gr van uitgedroogd medium en lost op in 940 ml gedestilleerd water. Verlaat het rustmengsel gedurende ongeveer 10 tot 10 minuten.

Het kan u van dienst zijn: interspecifieke relaties: typen en voorbeelden

Breng warmte aan om de omgeving regelmatig te roeren om het oplossingsproces te verbeteren. Laat een minuut koken. Sterilice in autoclaaf gedurende 15 minuten bij 121 ° C.

Laat staan ​​tot het een temperatuur van 45 ° C bereikt en voeg 50 ml eidooieremulsie en 10 ml 1% teluriet toe. Meng goed en serveer tussen 15 tot 20 ml op petri -steriele platen.

Laat stollen, bestel in een omgekeerde in plaatwaren en sla in de koelkast tot gebruik.

De uiteindelijke pH van het voorbereide medium moet 6,8 ± 0,2 zijn.

Voordat u een monster zaait, moet u wachten tot de plaat de temperatuur van de omgeving neemt. Zaai de plaques als gevolg van stralen of oppervlak geplant met Drigalski -spatel.

De kleur van het uitgedroogde medium is geroosterd en de kleur van het voorbereide medium is licht amber.

Gebruik

Klinische monsters

Klinische monsters worden rechtstreeks gezaaid door een deel van het materiaal aan één uiteinde van de plaat te ontladen, en van daaruit viel ze op als gevolg van uitputting. Incubeer gedurende 24 tot 48 uur bij 35-37 ° C.

Voedselmonsters

Weeg 10 gr van het voedselmonster en homogeniseren in 90 ml 0,1%peptonada -water, vanaf daar bereiden ze indien nodig verdunningen voor. Inoculeer de plaques in drievoud met 0,3 ml van de voorbereide oplossingen, en zaai aan oppervlak met Drigalski spatel. Het is 24 tot 48 uur incuba bij 35-37 ° C.

Met deze methodologie kunt u de typische verkregen kolonies tellen en is ideaal wanneer de aanwezigheid van S. aureus boven 10 UFC per gr/ml monster.

Als wordt vermoed dat het bedrag van S. aureus Het is klein of er is veel bijbehorende flora, er wordt voorgesteld. Dit zal de groei van S. aureus en remmen de ontwikkeling van de bijbehorende flora. De Tuft -buizen worden gezaaid in Baird Parker Agar.

Kan u van dienst zijn: hoe onderscheidt het levende organismen van onze omgeving?

Watermonsters

In een vacuüm- en gesteriliseerd filtratiesysteem wordt 100 ml wateronderzoek gefilterd en vervolgens wordt het microns van 0,4 microns verwijderd met een steriele klem en op een Baird Parker -plaat geplaatst. Het is 24 tot 48 uur incuba bij 35-37 ° C. Met deze techniek kunnen de typische kolonies op rekenen S. aureus.

QA

Om de kwaliteit van de Baird Parker -agar te evalueren, kunnen bekende stammen worden gebruikt, zoals Staphylococcus aureus ATCC 25923, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Escherichia coli ATCC 25922 O Proteus Mirabilis ATCC 43071.

In het geval van stammen van S. aureus Van ATCC is bekend dat het teluriet vermindert, en ze zijn positieve lipase en lecithinase. Daarom moet er een bevredigende ontwikkeling zijn en convexe kolonies laten groeien met zwart centrum en kleurloze rand, met een ondoorzichtige halo en nog een externe halo -helder.

Van zijn kant, van S. epidermidis Slechte ontwikkeling wordt verwacht in dit medium, met grijze kolonies afmeren tot zwart, zonder een heldere halo.

Voor EN. coli En P. Mirabilis Naar verwachting zal het volledig of gedeeltelijk worden geremd. In het geval van het kweken van bruine kolonies zonder ondoorzichtige zone, of heldere halo.

aanbevelingen

-Het medium mag niet worden verwarmd na het toevoegen van de telurito en eierdooier.

-De bereiding van eidooieremulsie en het aggregaat ervan in het midden is een zeer kwetsbare stap van besmetting. Er moet voorzichtig zijn.

-Als er aanwezig is van typische kolonies van S. aureus Het moet worden bevestigd door een coagulasetest te rijden voor de stam.

-Als er twijfelachtige resultaten zijn met coagulase, moeten andere bevestigende tests worden gemonteerd.

-Pas op dat u de aanwezigheid van typische koloniën van niet verwarren S. aureus Met de atypische zwarte kolonies.

Referenties

1. BD Laboratories. Baird Parker Agar. Beschikbaar op: BD.com
2. Laboratoria Francisco Soria Melguizo. Baird Parker Agar. Beschikbaar op: http: // f-soria.Het is/informeren